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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | SEKR-0009 |
用途 | |
檢測方法 | 雙抗體夾心法 |
CAS編號 | |
檢測限 | |
數(shù)量 | 10 |
包裝規(guī)格 | |
標(biāo)記物 | 腫瘤壞死因子α |
純度 | % |
樣本 | 血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本 |
應(yīng)用 | Elisa檢測 |
大鼠白介素TNF-a ELISA試劑盒
產(chǎn)品編號#:SEKR-0009
適用于大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本
結(jié)果判斷:
1.用酶標(biāo)儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進(jìn)行雙波長檢測,請用 450 nm 的OD測定值減去630 nm的OD測定值。
2.計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品、樣品的平均OD值:每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值
3.以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),吸光度OD值為縱坐標(biāo),用軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,樣品中TNF-a含量可通過對應(yīng)OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
4.若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)做適當(dāng)稀釋后重新檢測,計(jì)算濃度時(shí)再乘以稀釋倍數(shù)。
參數(shù)表征:
1. 數(shù)據(jù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線
標(biāo)準(zhǔn)品濃度(pg/ml) | OD值1 | OD值2 | 平均值 | 矯正值 |
0 | 0.042 | 0.043 | 0.0425 | --- |
31.25 | 0.079 | 0.086 | 0.0825 | 0.040 |
62.5 | 0.189 | 0.176 | 0.1825 | 0.140 |
125 | 0.326 | 0.306 | 0.316 | 0.273 |
250 | 0.531 | 0.553 | 0.542 | 0.499 |
500 | 0.839 | 0.852 | 0.845 | 0.803 |
1000 | 1.465 | 1.429 | 1.447 | 1.404 |
2000 | 2.531 | 2.571 | 2.551 | 2.508 |
2. 靈敏度:
*可檢測大鼠TNF-a濃度達(dá)15pg/ml,
20個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)品濃度OD的平均值加上兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差,計(jì)算相應(yīng)的可檢測濃度。
3. 特異性:
不與大鼠 GDNF、 IFN-γ、 IL-1β、 IL-2、 IL-4、 β-NGF等反應(yīng),人TNF-a、 TNF-β等反應(yīng)
4. 重復(fù)性:
板內(nèi),板間變異系數(shù)<10%
5. 回收率:
在選取的健康大鼠血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入 3 個(gè)不同濃度水平的大鼠 TNF-a,計(jì)算回收率。
樣本類型 | 平均回收率(%) | 范圍(%) |
血漿 | 89 | 82-101 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 | 91 | 85-108 |
6. 線性稀釋:
分別在選取的4 份健康大鼠血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入高濃度大鼠 TNF-a,在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋,評估線性。