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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | SEKM-0026 |
檢測限 | |
數(shù)量 | 10 |
檢測方法 | 雙抗體夾心法 |
標記物 | IL-25/IL-17E |
樣本 | 血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本 |
應用 | Elisa實驗 |
小鼠白細胞介素-25 ELISA 試劑盒
產(chǎn)品編號#:SEKM-0026
適用于小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本
背景介紹:
IL-25 是 IL-17 家族中發(fā)現(xiàn)的新成員之-,IL-17 家族是由新近發(fā)現(xiàn)的一組與 IL-17具有 29%~50%的同源性,由 155~197 個氨基酸組成的相對分子質(zhì)量大小在 20000~30000之間的細胞因子組成。目前認為 IL-17 家族中至少有 6 個成員,它們分別是 IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F。IL-17/IL-17A 是 IL-17 家族中的主要成員。IL-25 主要由活化的 Th 細胞和肥大細胞所分泌。與其他家族成員不同,IL-25 能夠誘導Th2 型細胞因子如 IL-4、IL-5 和 IL-13 的產(chǎn)生,介導 Th2 類免疫應答,還能夠影響 Th17 細胞的分化并調(diào)節(jié)自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展??傊琁L-25 在多種免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展中都發(fā)揮著重要的作用。
檢測原理:
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。將抗小鼠 IL-25/17E 單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本,標準品和樣本中的小鼠 IL-25/17E 會與酶標板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗小鼠 IL-25/17E 抗體,該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標準品和樣本中的小鼠 IL-25/17E發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強度的非共價結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物 TMB,若反應孔中樣品存在不同濃度的小鼠 IL-25/17E,則 HRP 會使無色 TMB 變成不同深淺(正相關)的藍色物質(zhì),加入終止液后反應孔會變成黃色;*,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應孔樣品吸光度(OD),樣本中的小鼠 IL-25/17E 濃度與 OD 成正比,通過繪制標準曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中小鼠 IL-25/17E 的濃度。
注意事項:※※※
1. 試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。. 6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
安全提示:試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物實驗室安全防護有關管理規(guī)定執(zhí)行。
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