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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號(hào) | SEKR-0004 |
| 用途 | |
| 檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法 |
| CAS編號(hào) | |
| 檢測(cè)限 | |
| 數(shù)量 | 10 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 標(biāo)記物 | IL-4 |
| 純度 | % |
| 樣本 | 血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本 |
| 應(yīng)用 | Elisa實(shí)驗(yàn) |
大鼠白介素 4 ELISA 試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)#：SEKR-0004
適用于大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本
背景介紹：
白細(xì)胞介素4是由活化的T淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞產(chǎn)生，在免疫應(yīng)答過程中具有多效性，成熟IL-4分子量為18-19KD的糖蛋白，大鼠IL-4前體蛋白含有24個(gè)氨基酸殘基的信號(hào)肽，成熟的大鼠IL-4蛋白序列與牛、人和小鼠的IL-4分別具有41%、43%和59%的序列同一性，IL-4的生物學(xué)活性包括：促使抗原或絲裂原活化的B細(xì)胞分裂增殖;促進(jìn)Tc細(xì)胞的活性; IL-4可增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的功能; IL-4與IL-3協(xié)同可維持和促進(jìn)肥大細(xì)胞的增殖;可與CSF協(xié)同作用，促進(jìn)骨髓造血前體細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)髓樣細(xì)胞定向分化;誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)血管細(xì)胞粘附子-1(VCAM-1)，對(duì)淋巴細(xì)胞的遷移具有一定意義
檢測(cè)原理：
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗大鼠 IL-4 單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上；分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本，標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠 IL-4 會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4 抗體，該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠 IL-4 發(fā)生特異性結(jié)合；洗板后加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合；洗板后加入顯色劑底物 TMB，若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的大鼠 IL-4，則 HRP 會(huì)使無色 TMB 變成不同深淺（正相關(guān)）的藍(lán)色物質(zhì)，加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色；*，在 λmax=450nm（OD=450 nm）處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度（OD），樣本中的大鼠 IL-4 濃度與 OD 成正比，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中大鼠IL-4 的濃度。
注意事項(xiàng)：※※※
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜（※）及潔凈塑料容器。.
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
安全提示：試劑盒中的終止液為酸性溶液，操作人員在使用時(shí)請(qǐng)帶上手套并注意防護(hù)；在操作過程中也要避免試劑接觸皮膚和眼睛，如果不慎接觸，請(qǐng)用大量清水清洗；檢測(cè)血液樣本及其它體液樣本時(shí)，請(qǐng)按國家生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)有關(guān)管理規(guī)定執(zhí)行。
樣本收集及儲(chǔ)存：
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本：
室溫血液自然凝固 20 min 后，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），保存過程中如有沉淀，請(qǐng)?jiān)俅坞x心，避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本：
將全血收集到含抗血凝劑的管中，根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA，檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合 20 min，在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min，然后將上清等量分裝于小EP 管并于-20℃下保存（24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存），避免反復(fù)凍融。
※注意：血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本，以免影響檢測(cè)結(jié)果；如果樣本中的靶標(biāo)物檢測(cè)濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品的*值，請(qǐng)將樣品做適當(dāng)倍數(shù)稀釋后檢測(cè)，建議正式實(shí)驗(yàn)前做預(yù)實(shí)驗(yàn)以確定稀釋倍數(shù)。
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