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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | SEKR-0027 |
檢測(cè)限 | 40 pg/ml |
數(shù)量 | 10 |
檢測(cè)方法 | 雙抗體夾心法 |
標(biāo)記物 | MMP-9 |
樣本 | Serum, plasma, Cell culture supernatant |
應(yīng)用 | Sandwich ELISA |
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶 9ELISA 試劑盒
產(chǎn)品編號(hào):SEKR-0027
適用于大鼠血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本
背景介紹:
基質(zhì)金屬蛋白酶,基質(zhì)金屬蛋白酶是一個(gè)大家族,因其需要 Ca、Zn 等金屬離子作為輔助因子而得名。其家族成員具有相似的結(jié)構(gòu),一般由 5 個(gè)功能不同的結(jié)構(gòu)域組成 :(1)疏水信號(hào)肽序列;(2)前肽區(qū),主要作用是保持酶原的穩(wěn)定。當(dāng)該區(qū)域被外源性酶切斷后,MMPs 酶原被激活;(3)催化活性區(qū),有鋅離子結(jié)合位點(diǎn),對(duì)酶催化作用的發(fā)揮至關(guān)重要;(4)富含脯氨酸的鉸鏈區(qū);(5)羧基末端區(qū),與酶的底物特異性有關(guān)?;|(zhì)金屬蛋白酶 9(MMP-9)是人體內(nèi)最重要的蛋白酶之一,屬于基質(zhì)金屬蛋白酶超家族成員中明膠酶的一種,又稱(chēng)明膠酶 B,其主要功能是分解細(xì)胞外基質(zhì),參與人體許多生理及病理過(guò)程,該因子在基質(zhì)金屬蛋白本科組織抑制劑(TIMPs)等,其作用底物主要是Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原,明膠及彈性纖維。
檢測(cè)原理:
Solarbio (Solarbio ®)ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。將抗大鼠 MMP-9單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本,標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠 MMP-9會(huì)與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗大鼠 MMP-9 抗體,該抗體會(huì)與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠 MMP-9 發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會(huì)發(fā)生高強(qiáng)度的非共價(jià)結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物 TMB,若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的大鼠 MMP-9,則 HRP 會(huì)使無(wú)色 TMB 變成不同深淺(正相關(guān))的藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會(huì)變成黃色;*,在λmax=450 nm(OD=450 nm)處測(cè)定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),樣本中的大鼠MMP-9 濃度與 OD 成正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和四參數(shù)擬合軟件便可計(jì)算出樣本中大鼠 MMP-9 的濃度。
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