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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC1505 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Plant nitrate nitrogen content detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進口 |
植物硝態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書
微量法
英文名稱：Plant nitrate nitrogen content detection kit
關(guān)鍵詞：植物硝態(tài)氮檢測|植物硝態(tài)氮|硝態(tài)氮|硝態(tài)氮檢測
注意：正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
貨號: BC1505
規(guī)格:100T/48S
產(chǎn)品簡介：
硝酸鹽是植物吸收的主要含氮物質(zhì)之一。硝酸鹽在植物體內(nèi)的還原部位不同, 可以在根內(nèi),也可以在枝葉內(nèi)進行, 且因植物類別和環(huán)境條件而異。因此,測定植物體內(nèi)硝酸氮含量變化對了解氮代謝機制有重要的意義。在濃酸條件下，NO3-可以與水楊酸反應(yīng)，生成硝基水楊酸，后者在 PH>12 的條件下呈黃色，在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與含量成正比，可比色測定計算得硝態(tài)氮含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：粉劑×2 支，4℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每支加入 0.5mL 濃硫酸充分溶解。
試劑二：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：粉劑×1 瓶，4℃保存。10 mg 硝suan鉀，臨用前加入 0.935mL 蒸餾水溶解，配成 1400μg/mL的 NO3-N 標準液
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL 蒸餾水）加入蒸餾水，室溫勻漿后置于 90℃恒溫水浴鍋中浸提 30min，期間不斷晃動或者置于 90℃恒溫搖床中振蕩提取 30min，待冷卻后于 25℃，12000g 離心 15min，取上清待測。
二、測定步驟：
1、 分光光度計/酶標儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 410nm，分光光度計蒸餾水調(diào)零。
2、 將 1400μg/mL NO3-N 標準液用蒸餾水 50 倍稀釋成 28μg/mL 的標準溶液。
3、 操作表：
試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管
樣本（μL）8 8
標準溶液（μL） 8
蒸餾水（μL） 12 8
試劑一（μL）12 - 12 12
充分混勻，25℃靜置 30min
試劑二（μL）280 280 280 280
混勻，渦旋振蕩，使出現(xiàn)的沉淀充分溶解，取 200μL 于微量玻璃比色皿/96孔板中測定 410nm 處吸光值 A，計算△A=A 測定管-A 對照管，△A 標準=A 標準管-A空白管。
植物 NO3-N 的計算
1、 按樣本鮮重計算
NO3- N 含量（μg/g 鮮重）=△A÷（△A 標準÷C 標準）×V 提取÷W=28×△A÷△A 標準÷W。
2、 按樣本蛋白濃度計算：
NO3- N 含量（μg/mg prot）=△A÷（△A 標準÷C 標準）×V 提取÷（Cpr×V 提取）
=28×△A÷△A 標準÷Cpr。
W：樣本質(zhì)量，g；
C 標準：標準溶液濃度，28μg/mL；
V 提取：提取液體積，0.3mL；
Cpr：樣品蛋白濃度，mg/mL。
注意事項
1、 試劑一配制好后盡快使用，4℃可保存一周。
2、 試劑一和試劑二均具有強腐蝕性，操作時需做好防護措施。
3、 △A 大于 1 時，建議將樣品稀釋后再進行測定。
相關(guān)文獻:
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影響因子:3.537 PMID:30048775
