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| 產地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC1525 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Plant ammonia nitrogen content detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質期 | 1年 |
| 是否進口 |
植物氨態(tài)氮含量檢測試劑盒說明書
微量法
英文名稱：Plant ammonia nitrogen content detection kit
關鍵詞：植物氨態(tài)氮檢測|植物氨態(tài)氮|植物氨態(tài)氮檢測測定|氨態(tài)氮
注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。
貨號：BC1525
規(guī)格：100T/96S
產品內容：
提取液：液體 120mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存，臨用前將試劑三倒入使其充分溶解備用。該試劑溶解后 10 天內有效。
試劑二：粉劑×2 支，4℃避光保存。臨用前加 1mL 蒸餾水充分溶解。
試劑三：液體 22mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：粉劑×1 支，10mg 半胱氨酸，4℃避光保存。臨用前加入 1.157mL 提取液，得到 1000μg/mL氮標準液
產品說明：
氮素是構成生物體的一種必需元素。銨態(tài)氮進入植物細胞后形成氨基酸或酰胺，植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應，產生藍紫色化合物，在 570 nm 有特征吸收峰；通過測定570 nm 吸光度，來計算氨基酸含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、無水乙醇、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
按照質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL 提取液）加入提取液，室溫勻漿后于 25℃，12000g 離心 10min，取上清待測。
二、測定步驟：
1、 分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 570nm，分光光度計蒸餾水調零。
2、 將 1000μg/mL 氮標準液用提取液分別稀釋為 200、100、50、25、12.5 μg/mL
3、 操作表：
試劑名稱（μL） 測定管 標準管 空白管
樣本 15 - -
標準品 - 15 -
蒸餾水 - - 15
試劑一 150 150 150
無水乙醇 150 150 150
試劑二 15 15 15
充分混勻后蓋緊瓶蓋封口膜封口（防止水分散失），置于沸水浴中保溫 10 min，冷卻后反復顛倒 EP 管數(shù)次，將測定管 8000rpm 離心 5min 后取上清，吸取 200μL 于微量玻璃比色皿或者 96 孔板中，于 570nm 測定吸光值。顯色后務必在 30min 內測完。計算△A=A 測定管-A 空白管，△A 標準=A標準管-A 空白管。
三、植物氨態(tài)氮含量計算：
1、標準曲線的繪制
以各個氮標準液為橫坐標，其對應的△A 標準為縱坐標，建立標準曲線，得到標準方程 y=kx+b，將△A 帶入方程中，得到 x (μg/mL)
2、NH3-N 含量的計算
（1）按樣本鮮重計算
NH3-N 含量（μg /g FW）=x×V 提取÷W= x÷W。
（2）按蛋白濃度計算
NH3-N 含量（μg /mg prot）=x×V 提取÷（Cpr×V 提取）= x÷Cpr。
W：樣品質量，g；
Cpr：蛋白濃度，mg/mL；
V 提?。簶悠诽崛∫嚎傮w積，1mL。
注意事項：
1. 為保證實驗結果的準確性，需先取 1-2 個樣做預實驗，如果測定的吸光值過高（0.6），用提取液稀釋后再測定。
相關文獻：
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影響因子:3.537 PMID:30048775
