|
| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC0755 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activity detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進口 |
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣 產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存； 參考價格：1440
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵字：乙醛脫氫酶試劑盒|活性檢測試劑盒| ALDH活性檢測|試劑盒|微量法
簡要介紹：
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化，所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時，乙醛脫氫酶在分子生物學以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm 處的吸光值會增加，測定340nm 處的吸光值變化，可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
產(chǎn)品詳細描述
| 商品貨號： | 商品品牌： | 規(guī)格 | 基本售價： | 選擇規(guī)格 |
| BC0755-100管/96樣 | Solarbio | 100管/96樣 | 1440.00元 |  |
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體6mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：液體2mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體1mL×1 支，4℃避光保存。
試劑四：液體1mL×1 支，4℃保存。
試劑五：液體1mL×1 支，4℃保存
產(chǎn)品說明：
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內(nèi)。主要 作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶 能把對生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化，所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時，乙醛脫氫 酶在分子生物學以及相關(guān)疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。 在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm 處的吸 光值會增加，測定340nm 處的吸光值變化，可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實驗用品及儀器： 天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔UV板、蒸餾水。
操作步驟：
ALDH 提?。?
組織：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：5-10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。12000rpm， 4℃離心 20 分鐘。
細胞：
按照細胞數(shù)量（10 4個）：提取液體積（mL）為 500-1000:1 的比例（建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細菌或細胞（功率 30%或 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒?？倳r間 3min）；10000rpm, 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測。
測定操作
| 對照管 | 測定管 | |
| 樣本(μL) | 40 | |
| 試劑一(μL) | 60 | 60 |
| 試劑二(μL) | 20 | 20 |
| 試劑三(μL) | 10 | 10 |
| 試劑四(μL) | 10 | 10 |
| 試劑五(μL | 10 | 10 |
| H2O(μL) | 90 | 50 |
充分混勻，1mL 石英比色皿，對照管調(diào)零，于340nm 處測定吸光值A(chǔ)1，迅速置于37℃水浴1min， 于340nm 處測定吸光值A(chǔ)2，△A= A1-A2。
ALDH 酶活計算
a． 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1） 按蛋白濃度計算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/mg prot）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T=804×△A÷Cpr
（2） 按樣本質(zhì)量計算
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/g）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T=804×△A÷W
（3） 按照細胞數(shù)量計算
酶活定義：每10 4個細胞每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/10 4 cell）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T =804×△A÷細胞數(shù)量（萬個）
（4）按液體體積計算
酶活定義：每毫升液體每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1U。
ALDH 酶活（U/mL）=△A÷(?× d) ×V反總÷V樣÷T=804×△A
? ：NADH 微摩爾消光系數(shù)，6.22×10 -3 L/μmol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應體 系總體積，0.2mL；V 樣：反應體系中樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr： 樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間：1min。
b．用 96 孔板測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原 1nmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/mg prot）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣×Cpr）÷T=1608×△A÷Cpr
（2） 按樣本質(zhì)量計算
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/g）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T=1608×△A÷W
（3） 按照細胞數(shù)量計算
酶活定義：每10 4個細胞每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活（U/10 4 cell）=△A÷(?× d) ×V反總÷（V樣÷V樣總×細胞數(shù)量（萬個））÷T =1608×△A÷細胞數(shù)量（萬個）
（4）按液體體積計算
酶活定義：每毫升液體每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1U。
ALDH 酶活（U/mL）=△A÷(?× d) ×V反總÷V樣÷T=1608×△A
? ：NADH 微摩爾消光系數(shù)，6.22×10 -3 L/μmol /cm；d：96 孔板光徑，0.5cm；V 反總：反應 體系總體積，0.2mL；V 樣：反應體系中樣本體積，0.04mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr： 樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：反應時間：1min。
相關(guān)文獻：
《Untangling the response of bone tumor cells and bone forming cells to matrix stiffness and adhesion ligand density by means of hydrogels》 作者:Tongmeng Jiang,Jinmin Zhao,Shan Yud,Zhengwei Mao,Changyou Gao,Ye Zhu,Chuanbin Mao,Li Zheng 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30343256
《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin 期刊:Biotechnology for Biofuels 影響因子:5.452 PMID:
