產(chǎn)品名稱: 漆酶活性檢測試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名:  Micro Laccase Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC1635        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：1620
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:   漆酶檢測試劑盒|漆酶活性檢測試劑盒|漆酶|試劑盒

簡要介紹：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
    漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測定ABTS 自由基的增長速率，可計(jì)算得漆酶的活性。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存。
工作液：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前加15mL 試劑一溶解。
產(chǎn)品說明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高
等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解
以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解產(chǎn)物ABTS 產(chǎn)生ABTS自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測定
ABTS 自由基的增長速率，可計(jì)算得漆酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

操作步驟：

• 酶液提取

1. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（10⁴個）：提取液體積（ml）為500-1000:1 的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率30％或300W，超聲3s，間隔7s，總時間3min），12000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（ml）為1:5-10 的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿；10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

3. 培養(yǎng)液：直接待檢。

• 測定操作表

• 酶活性計(jì)算公式：

1. 按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/mg prot）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷T= 65×△A÷Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義：每克樣品每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/g）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×W)÷T= 65×△A÷W

3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

酶活性定義：每10⁴個細(xì)胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/10⁴ cell）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷(V 樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總)÷T= 65×△A÷細(xì)胞數(shù)量

4. 按照液體體積計(jì)算

酶活性定義：每10⁴個細(xì)胞每分鐘氧化1nmol 底物ABTS 所需的酶量為一個酶活力單位（U）
漆酶活性（U/L）=△A÷(ε×d) ×V 反總÷V 樣÷T= 65000×△A
ε：ABTS 毫摩爾消光系數(shù)；36L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)總體積，0.7mL；V樣：反應(yīng)中樣本體積，0.1mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T:反應(yīng)時間，3min
注意事項(xiàng)：

1. 工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。

2. 測定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請將樣品用提取液?行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。