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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC2010 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Glycolate oxidase (GO) activity detection kit |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:1010
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 乙醇酸氧化酶檢測試劑盒|乙醇酸氧化酶檢測試劑盒|乙醇酸氧化酶|試劑盒
簡要介紹:
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸ben肼反應(yīng)生成乙醛酸ben腙,在324nm 有特征吸收峰。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體35mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加10mL雙蒸水充分溶解。(配好后3天內(nèi)使用完)
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸ben肼反應(yīng)生成乙醛酸ben腙,在324nm 有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。
操作步驟:
一、酶液提取
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。12000g, 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
二、測定操作
測定管 | |
樣本(μL) | 50 |
試劑一(μL) | 650 |
試劑二(μL) | 200 |
試劑三(μL) | 100 |
充分混勻,立即于1mL 石英比色皿中測定324nm 處10s和190s 吸光值A1 和A2,△A=A2- A1 |
三、計(jì)算公式:
按照樣本蛋白濃度計(jì)算
酶活單位定義:每毫克蛋白每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO活性(nmol/min /mg prot)= ΔA÷(ε×d)×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T=392×ΔA÷Cpr
(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活單位定義:每克組織每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO(nmol/min /g)= ΔA÷(ε×d)×V反總÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T= 392×ΔA÷W
ε:乙醛酸ben腙毫摩爾消光系數(shù):17L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應(yīng)總體積,1mL;V 樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W,樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,3min
注意事項(xiàng):
測定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),若吸光值較高,請將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
色素含量較高的樣品,可在提取酶時(shí)加活性炭吸附。