產(chǎn)品名稱: 乙醇酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名: Micro Glycollic Oxidase Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2015             產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣         產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：1940
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:  乙醇酸氧化酶檢測(cè)試劑盒|乙醇酸氧化酶檢測(cè)試劑盒|乙醇酸氧化酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對(duì)研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸ben肼反應(yīng)生成乙醛酸ben腙，在324nm 有特征吸收峰。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加5mL雙蒸水充分溶解。用不完的試劑-20℃保持，禁止反復(fù)凍融。
試劑三：液體2mL×1瓶，4℃保存。
產(chǎn)品說明：
乙醇酸氧化酶（EC1.1.3.15）是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶，也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶，它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，對(duì)研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。
乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸，乙醛酸和鹽酸ben肼反應(yīng)生成乙醛酸ben腙，在324nm 有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）。操作步驟：
一、酶液提取
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g， 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定操作

三、計(jì)算公式：
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下：

1. 按照樣本蛋白濃度計(jì)算

酶活單位定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO活性（nmol/min /mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T=392×ΔA÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活單位定義：每克組織每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO（nmol/min /g）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T= 392×ΔA÷W
ε：乙醛酸ben腙毫摩爾消光系數(shù)：17L/mmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 反總：反應(yīng)總體積，0.2V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.01L；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3min。
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下：

1. 按照樣本蛋白濃度計(jì)算

酶活單位定義：每毫克蛋白每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO活性（nmol/min /mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(V樣×Cpr) ÷T=784×ΔA÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活單位定義：每克組織每分鐘氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。
GO（nmol/min /g）= ΔA÷（ε×d）×V反總÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T= 784×ΔA÷W
ε：乙醛酸ben腙毫摩爾消光系數(shù)：17L/mmol/cm；d：比色皿光徑，0.5cm；V 反總：反應(yīng)總體積，0.2V 樣：反應(yīng)中樣本體積，0.01L；V 樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，3min。
注意事項(xiàng)：

1. 測(cè)定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高，請(qǐng)將樣品用提取液進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂屧贉y(cè)定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

2. 色素含量較高的樣品，可在提取酶時(shí)加活性炭吸附。