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北京索萊寶科技有限公司
產(chǎn)品展廳
多酚氧化酶測定試劑盒 (微量法) BC0195
  • 品牌:Solarbio
  • 產(chǎn)地:北京
  • 貨號:BC0195
  • 發(fā)布日期: 2019-11-05
  • 更新日期: 2025-07-09
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 北京
品牌 Solarbio
貨號 BC0195
用途 多酚氧化酶測定
英文名稱 Polyphenol oxidase assay kit
包裝規(guī)格 100管/48樣
純度 100管/48樣%
CAS編號
保質(zhì)期 1年
是否進(jìn)口

產(chǎn)品名稱:多酚氧化酶測定試劑盒 (微量法)
產(chǎn)品英文名:Micro Polyphenol Oxidase (PPO) Assay Kit
產(chǎn)品貨號:BC0195                          產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣                   產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4保存或-20保存;            參考價(jià)格:1000
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:多酚氧化酶測定試劑盒|微量法|

簡要介紹:
PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。
PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

產(chǎn)品詳細(xì)描述

商品貨號:商品品牌:規(guī)格基本售價(jià):選擇規(guī)格
BC0195-100/48Solarbio  100/481000.00


產(chǎn)品簡介: 
PPO 主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元 酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。 PPO 能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在 410nm 有特征光吸收。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑: 
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研 缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容: 
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,用前混勻即可;
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。

操作步驟:  
一、粗酶液提取: 
1、收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲 波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%,超聲 3 秒,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10 分鐘,取 上清,置冰上待測。
2、稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10 分鐘,取上清,置冰上待測。

二、測定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 410nm,蒸餾水調(diào)零。
2、樣本測定(在 EP 管中依次加入下列試劑)  

試劑名稱(μl)測定管對照管
試劑一200200
試劑二5050
樣本50
煮沸的樣本
50
37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)中準(zhǔn)確水浴 10min 后,迅速放入沸水中加熱 10min

充分混勻,5000g,常溫離心 10min,收集上清,取 200μL 至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,410nm 處檢測測定管和對照管吸光度,計(jì)算ΔA=A 測定-A 對照。

PPO活性計(jì)算:  
a.用微量玻璃比色皿測定的計(jì)算公式如下 
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/mgprot)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測 定-A 對照)÷蛋白濃度(mg/mL)=200×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL) 此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 g 組織在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為一個(gè)酶活力 單位。
PPO(U/g 鮮重)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測 定-A 對照)÷樣本鮮重(g/mL)=200×ΔA÷樣本鮮重(g/mL)
3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.01 定義為 一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/104 cell)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.01×(A 測 定-A 對照)÷500=0.4×ΔA

b.用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/mgprot)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測定-A 對照)÷蛋白濃度(mg/mL)=400×ΔA÷蛋白濃度(mg/mL) 此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2)按樣本鮮重計(jì)算: 
單位的定義:每分鐘每 g 組織在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為一個(gè) 酶活力單位。
PPO(U/g 鮮重)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測定-A 對照)÷樣本鮮重(g/mL)=400×ΔA÷樣本鮮重(g/mL)
3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每分鐘每 1 萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中(300μL)使 410nm 處吸光值變化 0.005 定義為 一個(gè)酶活力單位。
PPO(U/104 cell)=提取液總體積(1000μL)÷樣本體積(50μL)÷反應(yīng)時(shí)間(10min)÷0.005×(A 測定-A 對照)÷500=0.8×ΔA

注意事項(xiàng): 
不同樣本的多酚氧化酶*的反應(yīng)溫度略有差別,可在 25-37℃之間進(jìn)行調(diào)節(jié)。


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