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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC0090 |
用途 | 過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè) |
英文名稱(chēng) | Peroxidase (POD) detection kit |
包裝規(guī)格 | 50管/48樣 |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱(chēng):過(guò)氧化物酶(POD)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品英文名:Peroxidase (POD) Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào):BC0090 產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:360
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:過(guò)氧化物酶試劑盒|POD檢測(cè)試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
POD廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過(guò)氧化氫氧化酚類(lèi)和胺類(lèi)化合物,具有消除過(guò)氧化氫和酚類(lèi)、胺類(lèi)毒性的雙重作用。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
商品貨號(hào): | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價(jià): | 選擇規(guī)格 |
BC0090-50管/48樣 | 360.00元 | ![]() |
試劑的組成:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體×2 瓶,4℃保存;用時(shí)每瓶加入 5mL 試劑一;用不完的試劑 4℃保存一周;
試劑三:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
測(cè)定意義: POD(EC1.11.1.7)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過(guò)氧化氫氧化酚類(lèi) 和胺類(lèi)化合物,具有消除過(guò)氧化氫和酚類(lèi)、胺類(lèi)毒性的雙重作用。POD 催化 H2O2氧化特定底物, 在 470nm 有特征光吸收。
需自備的儀器和用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
1、 細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲 波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 8000g4℃離心 10min, 取上清,置冰上待測(cè)。 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、 血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟和加樣表:
測(cè)定前將試劑一、二和三 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)放置 10min。在 1mL 玻璃比 色皿中按順序加入上述試劑,立即混勻并計(jì)時(shí),記錄 470nm 下 30s 時(shí)的吸光值 A1 和 1min30s 后的 吸光值 A2。計(jì)算ΔA=A2-A1。
試劑名稱(chēng)(μL) | 測(cè)定孔 |
樣本 | 15 |
蒸餾水 | 270 |
試劑一 | 520 |
試劑二 | 130 |
試劑三 | 135 |
注意:
1. 若一次性測(cè)定樣本較多,可將試劑一、二、三和蒸餾水按比例配成混合液,在 37℃(哺乳動(dòng)物) 或 25℃(其它物種)放置 10min 以上,測(cè)定時(shí)加入 15μL 樣本和 1055μL 混合液測(cè)定。
2. 如果ΔA 小于 0.005,可將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到 5min。如果ΔA 大于 0.5,可將樣本用提取液稀釋后測(cè) 定,計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
三、POD 活性計(jì)算:
1、 血清(漿)POD 活性
單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式:POD(U/mL)=ΔA×V 反總÷V 樣÷0.01÷T=7133×ΔA
2、 組織、細(xì)菌或細(xì)胞 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 為一個(gè)酶活力單位。
POD(U/mgprot)=ΔA×V 反總÷(V 樣×Cpr)÷0.01÷T=7133×ΔA÷Cpr
(2) 按樣本鮮重計(jì)算
單位定義:每 g 組織在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 為一個(gè)酶活力單位。 POD(U/g 鮮重)=ΔA×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T=7133×ΔA÷W
(3) 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位定義:每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在每 mL 反應(yīng)體系中每分鐘 A470 變化 0.01 為一個(gè)酶活力單位。
POD(U/104cell)=ΔA×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T=14.27×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,1.07mL; V 樣:加入樣本體積,0.015mL;V 樣總:加入提取液體 積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量;500:細(xì)菌或細(xì) 胞總數(shù),500 萬(wàn)。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons》 作者:Yan-Jiao Yin, Chuan-Jiao Chen, Shi-Wei Guo, Ke-Ming Li, Yu-Nan Ma, Wu-Mei Sun, Fu-Rong Xu, Yong-Xian Cheng and Xian Dong 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:30337932