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產(chǎn)品名稱：過氧化物酶（POD）檢測試劑盒  微量法
產(chǎn)品英文名：Micro Peroxidase (POD) Assay Kit
產(chǎn)品貨號：BC0095                        產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣                    產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；          參考價格：720
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關鍵字：過氧化物酶試劑盒 

簡要介紹：
POD廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。

產(chǎn)品詳細描述

商品貨號：	商品品牌：	規(guī)格	基本售價：	選擇規(guī)格
BC0095-100管/96樣	720.00元

試劑的組成： 
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 20mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 0.2mL×1 瓶，4℃保存；用時每瓶加入 3mL 試劑一，現(xiàn)配現(xiàn)用，可 4℃保存一周；
試劑三：液體 3mL×1 瓶，4℃保存。

產(chǎn)品說明： 
POD（EC1.11.1.7）廣泛存在于動物、植物、微生物中，可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物，具有消除過氧化氫和酚類、胺 類毒性的雙重作用。POD 在有過氧化氫存在的情況下，能使愈創(chuàng)木酚發(fā)生氧化，生成茶褐色物質，該物質在 470nm 有*光吸收。
需自備的儀器和用品： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水

操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
1、 細菌、細胞或組織樣品的制備： 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲 波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 8000g4℃離心 10min， 取上清，置冰上待測。 組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、 血清（漿）樣品：直接檢測。

二、測定步驟和加樣表：
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長至 470nm，分光光度計蒸餾水調零。 2、 測定前將試劑一、二和三在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）放置 10min 以上。 3、 樣本測定表

在 EP 管中按順序加入上述試劑，立即混勻并計時，立即取 200μL 轉移至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，記錄 470nm 下 30s 時的吸光 值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。計算ΔA＝A2-A1。

POD 活性計算：
用微量玻璃比色皿測定的計算公式如下 

1. 血清（漿）POD 活性

單位的定義：每 mL 血清（漿）在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD（U/mL）＝245μL（反應體系）÷1000μL×血清（漿）總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA=4900×ΔA
2、組織 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA 測定÷蛋白質濃度（mg/mL） =4900×ΔA÷蛋白質濃度（mg/mL）
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD（U/g 鮮重）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA÷樣品質量（g/mL）=4900×ΔA÷ 樣品質量（g/mL）
3、細菌或細胞 POD 活性
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應體系） ÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL） ÷樣本體積（5μL） ÷0.01×ΔA÷蛋白質濃度（mg/mL） =4900×ΔA÷ 蛋白質濃度（mg/mL）
（2）按細菌或細胞密度計算 
單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD（U/104cell）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.01×ΔA÷細菌或細胞密度（104 cell/mL） =4900×ΔA÷細菌或細胞密度（104 cell/mL）

用 96 孔板測定的計算公式如下

1. 血清（漿）POD 活性

單位的定義：每 mL 血清（漿）在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD（U/mL）＝245μL（反應體系）÷1000μL×血清（漿）總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA=9800×ΔA
2、組織 POD 活性
 (1) 按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA 測定÷蛋白質濃度（mg/mL） =9800×ΔA÷蛋白質濃度（mg/mL）
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD（U/g 鮮重）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA÷樣品質量（g/mL）=9800×ΔA÷ 樣品質量（g/mL）
3、細菌或細胞 POD 活性
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。 
POD（U/mgprot）＝245μL（反應體系） ÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL） ÷樣本體積（5μL） ÷0.005×ΔA÷蛋白質濃度（mg/mL） =9800×ΔA÷ 蛋白質濃度（mg/mL）
（2）按細菌或細胞密度計算
單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD（U/104 cell）＝245μL（反應體系）÷1000μL×提取酶液總體積（1000μL）÷樣本體積（5μL）÷0.005×ΔA÷細菌或細胞密度（104cell/mL） =9800×ΔA÷細菌或細胞密度（104 cell/mL）

注意事項： 
1、 如一次測定的樣本數(shù)量較多，可將試劑一、二、三和蒸餾水按照比例混合，在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）放置 10min， 測定時加入 240μL 即可。
2、 樣本測定值如果小于 0.005，可將反應時間延長到 3-5 分鐘，計算時除以反應時間即可；如果高于 0.5，可將樣本用提取液進行 稀釋。計算時乘以相應的稀釋倍數(shù)即可。

相關文獻：

《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:3.032 PMID:
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons》 作者:Yan-Jiao Yin, Chuan-Jiao Chen, Shi-Wei Guo, Ke-Ming Li, Yu-Nan Ma, Wu-Mei Sun, Fu-Rong Xu, Yong-Xian Cheng and Xian Dong 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:30337932