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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC0095 |
用途 | POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。 |
英文名稱 | Peroxidase (POD) detection kit |
包裝規(guī)格 | 100管/96樣 |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
CAS編號 | |
保質期 | 1年 |
是否進口 | 否 |
產(chǎn)品名稱:過氧化物酶(POD)檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品英文名:Micro Peroxidase (POD) Assay Kit
產(chǎn)品貨號:BC0095 產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:720
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關鍵字:過氧化物酶試劑盒
簡要介紹:
POD廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。
產(chǎn)品詳細描述
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價: | 選擇規(guī)格 |
BC0095-100管/96樣 | 720.00元 | ![]() |
試劑的組成:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 0.2mL×1 瓶,4℃保存;用時每瓶加入 3mL 試劑一,現(xiàn)配現(xiàn)用,可 4℃保存一周;
試劑三:液體 3mL×1 瓶,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
POD(EC1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物、微生物中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺 類毒性的雙重作用。POD 在有過氧化氫存在的情況下,能使愈創(chuàng)木酚發(fā)生氧化,生成茶褐色物質,該物質在 470nm 有*光吸收。
需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
操作步驟:
一、粗酶液提?。?/span>
1、 細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲 波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 8000g4℃離心 10min, 取上清,置冰上待測。 組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、 血清(漿)樣品:直接檢測。
二、測定步驟和加樣表:
1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 470nm,分光光度計蒸餾水調零。 2、 測定前將試劑一、二和三在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)放置 10min 以上。 3、 樣本測定表
試劑名稱(μL) | 測定孔 |
樣本 | 5 |
蒸餾水 | 60 |
試劑一 | 120 |
試劑二 | 30 |
試劑三 | 30 |
在 EP 管中按順序加入上述試劑,立即混勻并計時,立即取 200μL 轉移至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,記錄 470nm 下 30s 時的吸光 值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。計算ΔA=A2-A1。
POD 活性計算:
用微量玻璃比色皿測定的計算公式如下
血清(漿)POD 活性
單位的定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mL)=245μL(反應體系)÷1000μL×血清(漿)總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.01×ΔA=4900×ΔA
2、組織 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mgprot)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.01×ΔA 測定÷蛋白質濃度(mg/mL) =4900×ΔA÷蛋白質濃度(mg/mL)
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD(U/g 鮮重)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.01×ΔA÷樣品質量(g/mL)=4900×ΔA÷ 樣品質量(g/mL)
3、細菌或細胞 POD 活性
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mgprot)=245μL(反應體系) ÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL) ÷樣本體積(5μL) ÷0.01×ΔA÷蛋白質濃度(mg/mL) =4900×ΔA÷ 蛋白質濃度(mg/mL)
(2)按細菌或細胞密度計算
單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。
POD(U/104cell)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.01×ΔA÷細菌或細胞密度(104 cell/mL) =4900×ΔA÷細菌或細胞密度(104 cell/mL)
用 96 孔板測定的計算公式如下
血清(漿)POD 活性
單位的定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mL)=245μL(反應體系)÷1000μL×血清(漿)總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.005×ΔA=9800×ΔA
2、組織 POD 活性
(1) 按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mgprot)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.005×ΔA 測定÷蛋白質濃度(mg/mL) =9800×ΔA÷蛋白質濃度(mg/mL)
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD(U/g 鮮重)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.005×ΔA÷樣品質量(g/mL)=9800×ΔA÷ 樣品質量(g/mL)
3、細菌或細胞 POD 活性
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD(U/mgprot)=245μL(反應體系) ÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL) ÷樣本體積(5μL) ÷0.005×ΔA÷蛋白質濃度(mg/mL) =9800×ΔA÷ 蛋白質濃度(mg/mL)
(2)按細菌或細胞密度計算
單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。
POD(U/104 cell)=245μL(反應體系)÷1000μL×提取酶液總體積(1000μL)÷樣本體積(5μL)÷0.005×ΔA÷細菌或細胞密度(104cell/mL) =9800×ΔA÷細菌或細胞密度(104 cell/mL)
注意事項:
1、 如一次測定的樣本數(shù)量較多,可將試劑一、二、三和蒸餾水按照比例混合,在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)放置 10min, 測定時加入 240μL 即可。
2、 樣本測定值如果小于 0.005,可將反應時間延長到 3-5 分鐘,計算時除以反應時間即可;如果高于 0.5,可將樣本用提取液進行 稀釋。計算時乘以相應的稀釋倍數(shù)即可。
相關文獻:
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《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons》 作者:Yan-Jiao Yin, Chuan-Jiao Chen, Shi-Wei Guo, Ke-Ming Li, Yu-Nan Ma, Wu-Mei Sun, Fu-Rong Xu, Yong-Xian Cheng and Xian Dong 期刊:Frontier in Immunology 影響因子:4.716 PMID:30337932