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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC1560 |
用途 | |
英文名稱 | Aspartate aminotransferase (GOT) test kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進口 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 30mL×1 瓶,4℃保存; 試劑一:液體 8mL×1 瓶, 4℃保存; 試劑二:液體 8mL×1 瓶, 4℃保存; 試劑三:液體 80mL×1 瓶,4℃保存; 標準品:液體 1mL×1 支,20μmol/mL 丙酮酸鈉標準品,4℃保存。
產(chǎn)品說明:
GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應,是氨基 酸代謝的重要酶。此外,GOT 在心肌細胞中含量*,臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔 助檢查。*損害時其血清濃度也可升高。 GOT 催化 α-酮戊二酸和天門冬氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進一 步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與 2,4-二硝基苯肼反應生成 2,4-二硝基苯腙,在堿性條件下顯棕 紅色;測定 505nm 吸光度的變化,即可計算 GOT 酶活力。
實驗需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
計算
1、標準曲線的繪制:
以各標準溶液濃度為 x 軸,以?A(A 標準管-A 空白管)為 y 軸做標準曲線,得到方程 y=kx+b。
將 (A 測定管-A 對照管)帶入方程求 x 值。
2、GOT 活性計算:
(1)按樣本鮮重計算:
單位定義:每小時每 g 鮮重樣品催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的量為一個 GOT 活力單位。 GOT(U/g 鮮重)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(W×V 樣本÷V 樣總)÷T=12x÷W。
(2)按樣本蛋白濃度計算:
單位定義:每小時每 mg 組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的量為一個 GOT 活力單位。 GOT(U/mgprot)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(Cpr×V 樣本)÷T=12x÷Cpr。
(3)按血清體積計算:
單位定義:每小時每 mL 血清樣品催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的量為一個 GOT 活力單位。 GOT(U/mL)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷V 樣本÷T=12x。 (
4) 按細胞數(shù)量計算:
單位定義:每小時每 104個細胞樣品催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的量為一個 GOT 活力單位。 GOT(U/104cell)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(V 樣本÷V 樣總×500)÷T=0.024x。 V 樣本:吸取樣本體積,0.02mL;V 試劑積,1mL;W:樣本鮮重,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度, mg/mL;T:反應時間,0.5h;500:細胞 數(shù)量或微生物數(shù)量,500 萬。