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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC1555 |
用途 | |
英文名稱 | Alanine aminotransferase (GPT) test kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。 試劑一:液體 3.5 mL×1 瓶,4℃保存; 試劑二:液體 3.5 mL×1 瓶,4℃保存; 試劑三:液體 30 mL×1 瓶,4℃保存; 標(biāo)準(zhǔn)品:液體 1mL×1 支,20μmol/mL 丙酮酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品,4℃保存。
產(chǎn)品說(shuō)明:
GPT(EC 2.6.1.2)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),在氨基酸 代謝中具有重要作用。此外,哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞 GPT 活性很高,當(dāng)肝細(xì)胞壞死,GPT 釋放到血液中,血清 GPT 活 性顯著增高。因此,GPT 被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害最敏感的檢測(cè)指標(biāo)。 GPT 催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成丙酮酸和谷氨酸;加入 2,4-二硝基苯肼溶液,不僅終止 上述反應(yīng),而且與酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在堿性條件下呈紅棕色,可以在 505nm 讀取吸光值 并計(jì)算酶活力。
試驗(yàn)中所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微玻璃比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾 水。
計(jì)算
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:
以各標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為 x 軸,以?A(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)為 y 軸做標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到方程 y=kx+b。將(A 測(cè)定 管-A 對(duì)照管)帶入方程求 x 值。
2、GPT 活性計(jì)算:
(1)按樣本鮮重計(jì)算:
單位定義:小時(shí) g 樣品催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的為一個(gè) GPT 活力單位。 GPT(U/g 鮮重)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(W×V 樣本÷V 樣總)÷T=12x÷W。
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位定義:小時(shí) mg 組織蛋白催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的為一個(gè) GPT 活力單位。
GPT(U/mg prot)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(Cpr×V 樣本)÷T=12x÷Cpr。
(3)按血清(漿)體積計(jì)算:
單位定義:小時(shí) mL 血清(漿)樣品催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的為一個(gè) GPT 活力單位。 GPT(U/mL)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷V 樣本÷T=12x。
(4)按細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)計(jì)算:
單位定義:小時(shí) 104個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌催化產(chǎn)生 1μmol 丙酮酸的為一個(gè) GPT 活力單位。 GPT(U/104 cell)=x×(V 樣本+V 試劑一)÷(500×V 樣本÷V 樣總)÷T=0.024x。 V 樣本:樣本體積,0.005mL;V 試劑一:試劑一體積,0.025mL;V 樣總:提取液體積, 1mL;W:樣本鮮 重,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;T:反應(yīng)時(shí)間,0.5h;500:細(xì)胞或 細(xì)菌總數(shù),萬(wàn)。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Hydroxychloroquine induced lung cancer suppression by enhancing chemo-sensitization and promoting the transition of M2-TAMs to M1-like macrophages》 作者:Yong Li, Fengjun Cao, Mingxing Li, Pindong Li, Yuandong Yu, Longchao Xiang, Tao Xu, Jinhua Lei, Yun Yan Tai, Jianyong Zhu, Bingbing Yang, Yingpin Jiang, Xiufang Zhang, Long Duo, Ping Chen & Xiongjie Yu 期刊:Journal of Experimental & Clinical Cancer Research 影響因子:5.646 PMID:30373678