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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC0025 |
用途 | 現(xiàn)詢客服 |
英文名稱 | Malondialdehyde (MDA) content detection kit |
包裝規(guī)格 | 100管/96樣 |
純度 | 現(xiàn)詢客服% |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進口 | 否 |
產(chǎn)品名稱:丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 微量法
產(chǎn)品英文名:Micro Malondialdehyde (MDA) Assay Kit
產(chǎn)品貨號:BC0025 產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:580
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:丙二醛試劑盒
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。
MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有*吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。
試驗中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存;
注意:臨用前注意試劑一是否完全溶解,如未溶解,可以70℃加熱,并震蕩以促進溶解。
簡要介紹:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。
MDA與硫代巴比tuo酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有*吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。
產(chǎn)品詳細描述
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價: | 選擇規(guī)格 |
BC0025-100管/96樣 | 580.00元 |
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。
測定原理:
MDA與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有*吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。
需要的儀器,耗材:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
MDA 提?。?/span>
1、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量 (104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL提 取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù)30 次); 8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織, 加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
測定步驟:
1、吸取 0.3mL 試劑一于 1.5mL離心管中,再加入 0.1mL樣本, 混勻。
2、95℃水浴中保溫 30min(蓋緊,防止水分散失),置于冰浴中冷卻,10000g,25℃,離心 10min。
3、吸取 200μL上清液于微量石英比色皿或96 孔板中,測定 532nm和 600nm處的吸光度, 記為 A532 和 A600,ΔA= A532-A600。
MDA 含量計算:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、血清(漿)中 MDA 含量的計算:
MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=25.8×ΔA
2、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算
(1)按照蛋白濃度計算
MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=25.8× ΔA ÷Cpr 需要另外測定,建議使用本公司 BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
(2)按照樣品質(zhì)量計算
MDA 含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總)=25.8×ΔA ÷W (3 ) 按照細菌或細胞密度計算:
MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.0516×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積, 4×10-4 L;ε:丙二醛摩爾消光系數(shù),155×103 L / mol /cm;d: 比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr: 樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細胞或細菌總數(shù),500 萬。
b.用 96 孔板測定的計算公式如下
1、血清(漿)中 MDA 含量的計算:
MDA 含量(nmol/ mL)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣=51.6×ΔA
2、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算
(1)按照蛋白濃度計算 MDA 含量(nmol/ mg prot)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣)=51.6×ΔA÷Cpr 需要另外測定,建議使用本公司 BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
(2)按照樣品質(zhì)量計算 MDA 含量(nmol/g 鮮重)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總)=51.6×ΔA÷W
(3 ) 按照細菌或細胞密度計算: MDA 含量(nmol/104)=[ ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總)=0.1032×ΔA
V 反總:反應(yīng)體系總體積,4×10-4 L;ε:丙二醛摩爾消光系數(shù),155×103 L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.1 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;Cpr: 樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細胞或細菌總數(shù),500 萬。
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