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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC1165 |
| 用途 | |
| 英文名稱 | Glutathione reductase (GR) detection kit |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體120mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體1mL×1支，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.0mL蒸餾水，混勻。
產(chǎn)品說明：
GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶，GR催化GSSG還原生成GSH，是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一（通常昆蟲中GR被TrxR取代）。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH，有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對活性氧清除起關(guān)鍵作用，此外GR還參與抗壞血酸－谷胱甘肽循環(huán)途徑。
GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH，同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+；NADPH在340 nm有特征吸收峰，相反NADP+在該波長無吸收峰；通過測定340 nm吸光度下降速率來測定NADPH脫氫速率，從而計(jì)算GR活性。
自備儀器和用品：
低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板（UV板）和蒸餾水
操作步驟：
一、粗酶液提取：
稱約0.1g組織，加入1.0 ml試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液，待測。
二、GR測定操作：
1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一置于25℃（普通物質(zhì)）或者37℃（哺乳動(dòng)物）中預(yù)熱30min以上。
3. 空白管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL試劑二，20μL試劑三，170μL試劑一，于340nm測定10s和190s吸光度，記為A空1和A空2。
4. 測定管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL試劑二，20μL試劑三，20μL上清液，150μL試劑一，于340nm測定10s和190s吸光度，記為A測1和A測2。
注：樣品測定10s時(shí)吸光度后，將比色皿放入25℃（普通物質(zhì)）或者37℃（哺乳動(dòng)物）水浴，3min后拿出，吸打混勻，立即測定190s時(shí)的吸光度。
注意事項(xiàng)：
（1）樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行，且須在當(dāng)日測定酶活力，勻漿液避免反復(fù)凍融；
（2）試劑三須現(xiàn)配現(xiàn)用，配置完后，置于冰上；
（3）測定前須先用1～2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，確保180s內(nèi)吸光值變化呈線性，哺乳動(dòng)物組織一般須用試劑一稀釋2～5倍；
（4）細(xì)胞中GR活性測定時(shí)，細(xì)胞數(shù)目須在300萬-500萬之間，細(xì)胞中GR的提取時(shí)可加試劑一后研磨或超聲波處理，不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan》 作者: Hua Li, Lanying Wang and Yanping Luo 期刊:molecules 影響因子:3.06 PMID:30301226
《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,Qibin Ma,Huaiyu Bu,Kang Chong,Yunyuan Xu 期刊:Journal of Plant Physiology 影響因子:2.825 PMID:30055519
《Cell death induced by α-terthienyl via reactive oxygen species-mediated mitochondrial dysfunction and oxidative stress in the midgut of Aedes aegypti larvae》 作者:JieZhangaShakilAhmadaLan-YingWangaQianHanbJian-ChunZhangaYan-PingLuo 期刊:Free Radical Biology and Medicine 影響因子:5.657 PMID:31022448
