產(chǎn)品名稱:：  抗壞血酸氧化酶(AAO)活性活性檢測試劑盒

產(chǎn)品英文名: Ascorbic Acid Oxidase（AAO）Activity Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC1260             產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣             產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：940
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字：：   ：  抗壞血酸氧化酶檢測試劑盒|AAO檢測試劑盒|抗壞血酸氧化酶|試劑盒

簡要介紹：
AAO 是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶”家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和 AAO與細(xì)胞壁代謝和生長有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的細(xì)胞色素 b 還原，該過程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長。
    AAO 可直接氧化 AsA，通過測定 AsA 的氧化量，可計(jì)算得 AAO 活力。 


產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入10mL蒸餾水充分溶解。
產(chǎn)品說明：
AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶”家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過質(zhì)膜上的細(xì)胞色素b還原，該過程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長。
AAO可直接氧化AsA，通過測定AsA的氧化量，可計(jì)算得AAO活力。
自備儀器和用品：
低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
    稱取約0.1g樣品，加提取液1.0 mL，冰上充分研磨，11000g 4℃離心20min，取上清液待測。
二、AAO測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到265 nm。
2. 試劑一在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min。
3.按下表依次在微量石英比色皿/96孔板中加入試劑

    迅速混勻后在265nm測定10 s和130 s光吸收的吸光值,分別為A1、A2，用A1減A2，得到△A空白管、△A測定管。
三、AAO活性計(jì)算：
使用1mL石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
（1）按蛋白濃度計(jì)算
AAO活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1μmol AsA 為1U。
AAO(U/mg prot) = (△A測定管-△A空白管)÷（ε×d）×V反總×10⁶÷(Cpr×V樣)÷T
=0.0923×(△A測定管-△A空白管) ÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
AAO活性單位定義：25℃中每克樣品每分鐘氧化1μmol AsA 為1U。
AAO(U/g 鮮重) = (△A測定管-△A空白管)÷（ε×d）×V反總×10⁶÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=0.0923×(△A測定管-△A空白管) ÷W
    ε：AsA在265nm處摩爾吸光系數(shù)為5.42×10⁴ L/mol/cm；d：比色皿光徑（cm），1 cm；V反總：反應(yīng)體系總體積（L），1000μL=1×10^-3 L；10⁶：1mol=1×10⁶μmol；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定，建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積（mL），100μL=0.1 mL；T：催化反應(yīng)時(shí)間（min），2min。