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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號(hào) | BC1245 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Dehydroascorbic acid (DHA) content detection kit |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價(jià)格:1440
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字:: 脫氫抗壞血酸檢測(cè)試劑盒|DHA檢測(cè)試劑盒| 脫氫抗壞血酸(DHA)含量檢測(cè)|試劑盒
簡(jiǎn)要介紹:
AsA作為植物細(xì)胞一個(gè)重要生理指標(biāo),其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對(duì)一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內(nèi),與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng),具有電子受體的作用。
DTT還原DHA生成AsA,通過(guò)測(cè)定體系中AsA的生成速率,即可計(jì)算出DHA含量。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體110 mL×1瓶,室溫保存。
試劑一:液體20 mL×1瓶,室溫保存。
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加入5mL蒸餾水充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,-20℃避光保存。臨用前加入5.743 mL蒸餾水充分溶解;吸取0.1 mL上述溶液,加入0.9 mL蒸餾水,混勻,即為0.1μmol/mL DHA。
產(chǎn)品說(shuō)明:
AsA作為植物細(xì)胞一個(gè)重要生理指標(biāo),其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對(duì)一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型,在生物體內(nèi),與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng),具有電子受體的作用。
DTT還原DHA生成AsA,通過(guò)測(cè)定體系中AsA的生成速率,即可計(jì)算出DHA含量。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品中DHA提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加提取液1 mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測(cè)。
二、DHA測(cè)定操作:
1. 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到265 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min以上。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液、160μL預(yù)熱的試劑一和20μL試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s和130s的吸光值,分別為A1,A2,△A標(biāo)準(zhǔn)管=A2-A1。
4. 測(cè)定管:依次在微量石英比色皿/96孔板加入20μL上清液、160μL預(yù)熱的試劑一和20μL試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄10s和130s的吸光值,分別為A3,A4,△A測(cè)定管=A4-A3。
三、DHA含量計(jì)算公式:
(1)按蛋白濃度計(jì)算
DHA(μmol/mg prot) =C標(biāo)準(zhǔn)液×(△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管)÷Cpr
=0.1×△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
DHA(μmol/g 鮮重) = [C標(biāo)準(zhǔn)液×(△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管)×V樣總]÷W
=0.1×△A測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷W
C標(biāo)準(zhǔn)液:DHA濃度,0.1μmol/mL;V樣總:上清液總體積,1.0mL;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣品質(zhì)量,g。
注意事項(xiàng):
臨用前配制的試劑未使用完的4℃保存,3天內(nèi)使用完。
*檢出限為10μmol/L。