產(chǎn)品名稱: 酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)活性檢測(cè)試劑盒 微量法

產(chǎn)品英文名:  Micro Acyltransferase（AAT）Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2355          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：6400
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字: ： ?；D(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒|AAT檢測(cè)試劑盒| ?；D(zhuǎn)移酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?；腿ヵ；磻?yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測(cè)定412 nm吸光度增加速率，來(lái)計(jì)算AAT活性。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體100 mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體15 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存。臨用前加蒸餾水1mL充分溶解，4℃保存。
試劑三：液體2 mL×1瓶，4℃保存。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入試劑一1mL充分溶解，4℃避光保存.

產(chǎn)品說(shuō)明：
AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族，主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種酰基化和去?；磻?yīng)，在基因表達(dá)、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用。
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙酰基到丁醇，同時(shí)還原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，測(cè)定412 nm吸光度增加速率，來(lái)計(jì)算AAT活性。

自備儀器和用品：
  可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水


操作步驟：

• 樣本的前處理：

稱取約0.1g樣品，加提取液1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清液待測(cè)。

• 測(cè)定步驟：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑一在37℃水浴保溫30 min以上。

3. 樣本測(cè)定

將上述試劑按順序加入1 mL 玻璃比色皿中，加試劑四的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，在412nm 波長(zhǎng)下記錄10s時(shí)的初始吸光度A1 和130s后的吸光值A2，計(jì)算ΔA空= A2空-A1空；ΔA測(cè)= A2測(cè)-A1測(cè)，ΔA=ΔA測(cè)-ΔA空。
注：如果△A測(cè)偏低，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間，如測(cè)定10 s和310 s的吸光度，相應(yīng)修改計(jì)算公式中反應(yīng)時(shí)間。

三、AAT活性計(jì)算：
a.使用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下：

1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每毫克蛋白每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。。
AAT (U/mg prot) = 1000×ΔA÷(Cpr×V樣) ÷T×（V反總÷1）= 5000×ΔA÷Cpr；
此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

2. 按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每克組織每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。
AAT (U/g 鮮重) = 1000×ΔA÷(V樣÷V樣總×W) ÷T×（V反總÷1）=5000×ΔA÷W

3. 按血清濃度計(jì)算：

單位的定義：37℃中每mL反應(yīng)體系下每mL血清每分鐘催化吸光值變化0.001個(gè)單位為1U。
AAT (U/mL 血清) = 1000×ΔA÷V血清÷T×（V反總÷1）= 5000×ΔA。
  Cpr：上清液蛋白濃度，mg/mL；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.02mL；W ：樣品質(zhì)量；V樣總：提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2min；V血清：0.02mL;V 反總：反應(yīng)總體積，0.2mL；1：每mL反應(yīng)體系。