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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC2130 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Tissue and blood acid phosphatase (ACP) activity assay kit |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:190
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 酸性磷酸酶檢測試劑盒|ACP檢測試劑盒|組織及血液酸性磷酸酶|試劑盒
簡要介紹:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵qing化鉀反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃避光保存,變成藍(lán)綠色不能使用。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,2μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。臨用前蒸餾水稀釋至0.5μmol/mL備用。
產(chǎn)品說明:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機(jī)磷酸,常見于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚,苯酚與4-氨基安替和鐵qing化鉀反應(yīng)生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸餾水。
操作步驟:
粗酶液提取:
稱取約0.1g組織,加提取液1mL充分研磨,4℃、10000rpm離心10min,取上清液待測。血液可直接用于測定,如果濃度高的話,用提取液稀釋。
測定操作:
1.分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑一置于37℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
蒸餾水 | - | - | 100 | - |
0.5μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)品 | - | - | - | 100 |
上清液 | 100 | - | - | - |
試劑一 | 200 | 200 | 200 | 200 |
試劑二 | 200 | 200 | 200 | 200 |
混勻后置于37℃水浴中保溫15min | ||||
試劑三 | 600 | 600 | 600 | 600 |
上清液 | - | 100 | - | - |
混勻后于510 nm測定吸光度,分別記為A測定管、A對照管、A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管。 |
三、ACP活性計算:
1.按蛋白濃度計算
活性單位定義:37℃中每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚。
ACP(U/mg pr)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣]÷(Cpr×V樣)÷T
=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管) ÷Cpr
2.按樣本鮮重計算
活性單位定義:37℃中每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1 μmol酚。
ACP活力(U/g)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷(W÷V提取×V樣)÷T
=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
3.血液中ACP活性計算
活性單位定義:37℃中每毫升血液每分鐘催化產(chǎn)生1μmol酚。
ACP活力(U)= [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×V樣] ÷V樣÷T
=0.033×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)
C標(biāo)準(zhǔn)品:0.5μmol/mL; V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積(mL),0.1mL;V樣總:1mL;T:反應(yīng)時間(min),15 min;V提取:加入提取液體積,1mL;W:樣本鮮重,g。
注意事項:
1、 試劑一、試劑二和試劑三均需避光保存。
2、 試劑三變藍(lán)綠色后不能再使用。
3、 加入試劑三后必須立即混勻,否則顯色不完全。
4、 ACP不穩(wěn)定,尤其在37℃和pH大于7的條件下活力喪失快,因此酸性磷酸酶樣品一般需當(dāng)天準(zhǔn)備;血清樣品中,每毫升血清中加入10mg檸檬酸氫二鈉或者5mg硫suan氫鈉,使pH降至6.5以下,或5ml血清加入30%CH3COOH溶液2~3滴,置于4℃可保存1周。