產(chǎn)品名稱: 異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Isocitrate Lyase（ICL)Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2030          產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣        產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：1040
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:   異檸檬酸裂解酶檢測(cè)試劑盒|ICL檢測(cè)試劑盒|異檸檬酸裂解酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過程中，通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL 是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。 
    ICL 催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和 NADH 在 LDH 的作用下生成乙醇和NAD，NADH 在 340nm 下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè) 340nm 吸光度的減小速率可間接反應(yīng) ICL 活性。 

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體8mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體10mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入6mL雙蒸水，充分混勻待用；用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑四：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入6mL雙蒸水，充分混勻待用；用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑五：液體×2支，4℃保存；臨用前每支加入400μL雙蒸水，充分混勻待用；用不完的試劑仍4℃保存；
試劑六：粉劑×2瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入6mL雙蒸水，充分混勻待用；用不完的試劑-20℃保存。
產(chǎn)品說明：
ICL（EC4.1.3.1）主要存在于植物和微生物中，油料作物種子在萌發(fā)過程中，通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉(zhuǎn)變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。
ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸，乙醛酸和NADH在LDH的作用下生成乙醇和NAD，NADH在340nm下有特征吸收峰，監(jiān)測(cè)340nm吸光度的減小速率可間接反應(yīng)ICL活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、樣品前處理：
1、細(xì)菌或細(xì)胞處理：收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率20％，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），15000g，4℃，離心20分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織處理：稱取約0.1g組織，加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿；15000g ，4℃，離心20分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、工作液配制：按試劑一：試劑二：試劑三：試劑四：試劑五=29:35:42:42:3的比例將各試劑混合后備用。
3、樣本測(cè)定

 將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中，加試劑六的同時(shí)開始計(jì)時(shí)，在340nm波長(zhǎng)下記錄10秒時(shí)的初始吸光度A1，比色后迅速將比色皿連同反應(yīng)液一起放入37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)2分鐘；迅速取出比色皿并擦干，340nm下比色，記錄2分10秒時(shí)的吸光度A2，計(jì)算ΔA=A1-A2。
注意事項(xiàng)：
1、測(cè)定過程中樣本和所有試劑在冰上放置，以免變性和失活。
2、比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃，取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水，將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。