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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | Solarbio |
| 貨號 | BC3610 |
| 保存條件 | 2-8℃保存 |
| 英文名稱 | Basic xylanase (BAX) activity detection kit |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 1年 |
堿性木聚糖酶（BAX）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法
產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品商標：solarbio
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC3610
規(guī)格：50T/24S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；
參考價格：460.00
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：堿性木聚糖酶|堿性木聚糖酶活性檢測|BAX|BAX活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
緩沖液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15mL×1 瓶，4℃避光保存。
標準品：粉劑×1 支，4℃保存。10mg 木糖。臨用前加入 667μL 蒸餾水配制成 100μmol/mL 的木糖標
準溶液。再稀釋 50 倍即 2μmol/mL 的木糖標準溶液備用。
產(chǎn)品說明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，
可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質(zhì)的釋
放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)
中，堿性木聚糖酶（BAX）一般分離自最適生長 pH 為 9-11 的微生物。
BAX 在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與 3,5-二硝基
水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在 540nm 處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，
通過測定反應(yīng)液在 540nm 吸光值增加速率，可計算 BAX 活力。
需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋，可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取
1. 發(fā)酵液：發(fā)酵液于 8000rpm，4℃，離心 15min，取上清，作為待測樣品。
2. 酶干粉：稱約 1mg，加 1mL 緩沖液溶解，蒸餾水稀釋 10 倍待測。
3. 組織樣品：稱約 0.1g 組織，加入 1mL 緩沖液，冰上充分研磨。8000rpm，4℃，離心 15min，取
上清蒸餾水稀釋 10 倍待測。
二、測定步驟
1、可見分光光度計預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 540nm，蒸餾水調(diào)零。2、樣本測定（在 EP 管中加入下列試劑）
試劑名稱（μL） 對照管 測定管 空白管 標準管
樣品 200 200 - -
2μmoL/mL 木糖標準品 - - - 200
蒸餾水 - - 200 -
緩沖液 300 300 300 300試劑一 - 200 200 200
混勻，50℃水浴中反應(yīng) 30min，立即沸水浴中 10min 滅活。(注意不要讓蓋子爆開，以免進
水，改變了反應(yīng)體系)
試劑一 200 - - -
試劑二 300 300 300 300
混勻，沸水浴中顯色 5min(注意不要讓蓋子爆開，以免進水改變了反應(yīng)體系)，冷卻后盡快
測定各管 540nm 下的吸光度，分別記為 A 測定、A 對照、A 標準、A 空白。
三、BAX 活性計算：
1. 發(fā)酵液 BAX 活力計算：
酶活定義：50℃，pH 9.0 條件下，每毫升發(fā)酵液每分鐘分解木聚糖產(chǎn)生 1μmol 還原糖所需的酶
量為一個堿性木聚糖酶的活力單位。
BAX 活力（U/mL）=C 標準×（A 測定-A 對照）÷（A 標準-A 空白）÷T
=0.067×（A 測定-A 對照）÷（A 標準-A 空白）
C 標準：木糖標準溶液濃度，2μmoL/mL；T：反應(yīng)時間，30min。
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