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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC3120 |
保存條件 | 2-8℃保存 |
英文名稱 | Plant Dehydrogenase (PDHA) Activity Detection Kit |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣 產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:780
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵字: 植物脫氫酶檢測試劑盒|PDHA檢測試劑盒|植物脫氫酶|試劑盒
簡要介紹:
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài),能直接表示生物細胞對其基質(zhì)降解能力的強弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,即TTC)在細胞呼吸過程中接受氫以后,其還原產(chǎn)物三苯基甲替(TriphenylFormazone,即TFF)呈現(xiàn)紅色,在波長485nm處有*吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得植物脫氫酶活性。
產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:粉劑×2瓶。使用前加少量水溶解,定容至30mL,避光、4℃保存(盡量現(xiàn)配現(xiàn)用)。
試劑二:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:乙酸乙酯,自備。
產(chǎn)品說明:
生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , PDHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài),能直接表示生物細胞對其基質(zhì)降解能力的強弱。
受氫體2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,即TTC)在細胞呼吸過程中接受氫以后,其還原產(chǎn)物三苯基甲替(TriphenylFormazone,即TFF)呈現(xiàn)紅色,在波長485nm處有*吸收峰,采用分光光度法于485nm測定其吸光值,即得植物脫氫酶活性。
自備實驗用品及儀器
臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水、乙酸乙酯(不允許快遞,請用戶自備)。
操作步驟:
一、樣品前處理:
稱取0.1g的植物組織,用雙蒸水清洗3-4次,用濾紙吸干水分,備用。
二、測定步驟
可見分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至485nm,乙酸乙酯調(diào)零。
操作表:取5mLEP管依次加入
對照管 | 測定管 | |
樣品(g) | 0.1 | 0.1 |
試劑一(mL) | 1 | |
試劑二(mL) | 2 | 1 |
充分混勻,37℃,暗培養(yǎng)3h,取出后立即冰浴5min,去濾液,盡量用濾紙吸干樣品,置于研缽/勻漿器中。 | ||
試劑三(mL) | 1 | 1 |
充分研磨(建議在通風(fēng)櫥操作)后全部移至離心管中,用少量試劑三沖洗研缽,一起加入離心管,用試劑三定容至2mL,10000rpm/min,4℃,離心5min,取上清,測定485nm下的吸光值。計算ΔA=A測定-A對照。 |
三、脫氫酶活性計算:
酶活單位定義:在37℃時,每小時每克組織樣品使反應(yīng)體系吸光值每增加0.01為一個酶活單位。
脫氫酶活性(U/g/h)=ΔA÷0.01÷T÷W=33×ΔA÷W。
T:反應(yīng)時間,3h;W:樣品鮮重,g。
注意事項:
配制好的試劑一避光保存于4℃,盡量在一周內(nèi)使用,若出現(xiàn)紅色,則不能使用。
試劑三易揮發(fā),有毒,為了您的健康,請穿實驗服,戴口罩,戴乳膠手套操作。
反應(yīng)完成后立即冰浴以終止反應(yīng),并去除干凈殘留的反應(yīng)液。
如果測定出來的吸光值較大,需把樣品適當(dāng)稀釋再進行測定,注意計算公式乘以稀釋倍數(shù)。