產(chǎn)品名稱: 山梨醇脫氫酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名: Sorbitol Dehydrogenase (SDH) Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2530    產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣       產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：940
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:    山梨醇脫氫酶檢測(cè)試劑盒|山梨醇脫氫酶含量檢測(cè)試劑盒|山梨醇脫氫酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖，是調(diào)控生物體內(nèi)山梨醇含量的關(guān)健酶之一。
SDH催化山梨醇脫氫生成果糖，同時(shí)還原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能將電子傳遞給NBT生成紫色的甲簪，根據(jù)這一原理可以計(jì)算SDH活性。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：液體125mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1支，-20℃保存；
試劑三：粉劑×1支，-20℃保存；
混合液：將75mL提取液加入試劑一中，再?gòu)脑噭┮恢蟹謩e吸取適量液體將試劑二和試劑三溶解后轉(zhuǎn)移到試劑一中，混勻?？梢悦科?/span>15mL分裝，-20℃保存。
試劑四：粉劑×5瓶，-20℃保存。臨用前加入15mL混合液，即為工作液。現(xiàn)用現(xiàn)配，24h變質(zhì)。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支，-20℃保存。臨用前加入1.4mL蒸餾水，即10μmol/mL NADH標(biāo)準(zhǔn)品。
產(chǎn)品說(shuō)明：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山梨醇脫氫生成果糖，是調(diào)控生物體內(nèi)山梨醇含量的關(guān)健酶之一。
SDH催化山梨醇脫氫生成果糖，同時(shí)還原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能將電子傳遞給NBT生成紫色的甲簪，根據(jù)這一原理可以計(jì)算SDH活性。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取：
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，
加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
3、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟：
1、可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至570nm，蒸餾水調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)管的測(cè)定：
   將10μmol/mL NADH標(biāo)準(zhǔn)品用水稀釋至1.5、1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后按下表操作：

3、樣本的測(cè)定：

將上述試劑按順序加1 mL玻璃比色皿中，加樣本的同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，記錄 10 秒時(shí)的初始吸光度A1，比色后迅速將比色皿連同反應(yīng)液一起放入37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴中準(zhǔn)確反應(yīng)3分鐘；迅速取出比色皿并擦干，570nm下比色，記錄3分10秒時(shí)的吸光度A2，計(jì)算        ΔA測(cè)定=A1-A2。 


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