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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | Solarbio |
貨號 | BC2025 |
用途 | |
英文名稱 | Acetylcholinesterase (AchE) activity assay kit |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 1年 |
是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體70mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入5.2mL試劑一,充分震蕩溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一,充分震蕩溶解。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水溶解備用。
產(chǎn)品說明:
乙酰膽堿酯酶(AchE)屬于絲氨酸水解酶,廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰膽堿(Ach)水解,在神經(jīng)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)中起重要作用。
AchE催化Ach水解生成膽堿,膽堿與二硫?qū)ο趸鵥en甲酸(DTNB)作用生成5-巰基-硝基ben甲酸(TNB);TNB在412nm處有吸收峰,通過測定412 nm吸光度增加速率,計算AchE活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量玻璃比色皿/96孔板,勻漿器/研缽,蒸餾水。
操作步驟:
粗酶液提取:
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清液待測。
細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
血清等液體:直接測定。
測定操作:
可見分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到412 nm,蒸餾水調(diào)零。
操作表:
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 15 | 15 |
試劑二 | 50 | - |
37℃ 水浴準(zhǔn)確反應(yīng)5min。 | ||
試劑四 | 50 | 50 |
試劑二 | - | 50 |
混勻后12000rpm常溫離心5min。分別吸取10μL上清液 于新的EP管或96孔板中,之后分別加入。 | ||
試劑一 | 170 | 170 |
試劑三 | 20 | 20 |
混勻,放置2min后于微量玻璃比色皿中或96孔板中測定412nm處的吸光度,記為A測定管,A對照管,計算ΔA=A測定管-A對照管。 |
注意事項:
1.測定過程中樣本和工作液在冰上放置,以免變性和失活。
2.當(dāng)吸光值大于1時,建議將樣本稀釋后測定。
相關(guān)文獻(xiàn):
《Chronic toxicity and biochemical response of Apis cerana cerana (Hymenoptera: Apidae) exposed to acetamiprid and propiconazole alone or combined》 作者:Wensu Han,Yemeng Yang,Jinglin Gao,Dongxiang Zhao,Chengcai Ren,Shijie Wang,Shan ZhaoYihai Zhong 期刊:Ecotoxicology 影響因子:2.46 PMID:30874992
《Neuroprotective effects of cordycepin inhibit Aβ-induced apoptosis in hippocampal neurons》 作者:Hao Song,Li-Ping Huang,Yuping Li,Chao Liu,Songhua Wang,Wei Meng,Shanshan Wei,Xin-Ping Liu,Yanchun Gong,Li-Hua Yao 期刊:NeuroToxicology 影響因子:3.263 PMID:30031108
《Effects of Phytase Transgenic Maize on the Physiological and Biochemical Responses and the Gut Microflora Functional Diversity of Ostrinia furnacalis》 作者:Xiao Hui Xu, Yinghui Guo, Hongwei Sun, Fan Li, Shuke Yang, Rui Gao & Xingbo Lu 期刊:Scientific Reports 影響因子:4.011 PMID:29535326