產(chǎn)品名稱:：  糜蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品英文名:  Chymotrypsin Assay Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2330              產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣           產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價(jià)格：780
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:：  糜蛋白酶檢測(cè)試劑盒|糜蛋白酶檢測(cè)|糜蛋白酶|試劑盒

簡(jiǎn)要介紹：
糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過(guò)測(cè)定237nm光吸收增加速率，來(lái)計(jì)算糜蛋白酶活性。

產(chǎn)品詳細(xì)描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入50 mL 蒸餾水充分溶解。

產(chǎn)品說(shuō)明：
    糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對(duì)膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過(guò)測(cè)定237nm光吸收增加速率，來(lái)計(jì)算糜蛋白酶活性。
試驗(yàn)所需自備儀器和樣品：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、 1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積（ml）1：5-10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清即粗酶液。

• 測(cè)定：

1. 分光光計(jì)預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 237 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于37℃水浴中保溫30min。

3. 空白管：取1mL 石英比色皿，加入100μL 試劑一，1000μL 試劑二，充分混勻，于237nm 處測(cè)定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A空白管。（從吸光值穩(wěn)定增加開(kāi)始計(jì)時(shí)）

4. 測(cè)定管：取1mL 石英比色皿，加入100μL 粗酶液，1000μL 試劑二充分混勻，于237nm 處測(cè)定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A測(cè)定管。（從吸光值穩(wěn)定增加開(kāi)始計(jì)時(shí)）

注意：空白管只需要測(cè)定一次。


三、糜蛋白酶活性計(jì)算：

1. 按蛋白濃度計(jì)算
   活性單位定義： 25度每毫克蛋白每分鐘催化 吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶活(U/mg prot)= [ (△A 測(cè)定管-△A 空白管)×V 反總] ÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管-△A 空白管)÷Cpr
V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），100μL=0.01 L； Cpr：粗酶液蛋白濃度（ mg/mL），需要另外測(cè)定；V 反總：反應(yīng)總體積，1100μL =1.1 mL； T：反應(yīng)時(shí)間，4 min。
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：25度每毫克蛋白每分鐘催化 吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。
糜蛋白酶活(U/g)= [ (△A 測(cè)定管-△A 空白管)×V 反總] ÷(W×V1÷V 2)÷T
=2.75×(△A 測(cè)定管-△A 空白管)÷W
V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），100μL=0.01 L； V 反總：反應(yīng)總體積，1100μL =1.1 mL；W，樣本質(zhì)量，g；T：反應(yīng)時(shí)間，4 min。
注意事項(xiàng)：

1. 臨用前配置的試劑配置好后3天內(nèi)使用完畢。