產(chǎn)品名稱:：  糜蛋白酶活性檢測試劑盒  微量法

產(chǎn)品英文名:  Micro Chymotrypsin Assay Kit

產(chǎn)品貨號：BC2335              產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓

產(chǎn)品規(guī)格：100管/96樣           產(chǎn)品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            參考價格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨                          
關(guān)鍵字:：  糜蛋白酶檢測試劑盒|糜蛋白酶檢測|糜蛋白酶|試劑盒

簡要介紹：
糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過測定237nm光吸收增加速率，來計算糜蛋白酶活性。

產(chǎn)品詳細描述
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加入20mL蒸餾水充分溶解。

產(chǎn)品說明：
    糜蛋白酶，又稱胰凝乳蛋白酶，是*分泌的一種蛋白水解酶，能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似，但是具有分解能力強、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化，對膿性和非膿性痰液均有效；也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合，如白內(nèi)障摘除。
糜蛋白酶催化ATEE水解，產(chǎn)物在237nm有特征光吸收；通過測定237nm光吸收增加速率，來計算糜蛋白酶活性。
試驗所需自備儀器和樣品：
臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板(UV 板)、冰和蒸餾水。

操作步驟：
一、粗酶液提?。?/span>
組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積（ml）1：5-10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml試劑一進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清即粗酶液。

• 測定：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長到237nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二置于37℃水浴中保溫30min。
3. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL試劑一，200μL試劑二，混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A 空白管。（從吸光值穩(wěn)定增加開始計時）
4. 測定管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL 粗酶液，200μL試劑二，混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化，記為△A測定管。（從吸光值穩(wěn)定增加開始計時）
注意：空白管只需要測定一次。


三、糜蛋白酶活性計算：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個酶活單位。
糜蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測定管－△A 空白管) ×V 反總÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 測定管－△A 空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算
活性單位定義：25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個酶活單位。
糜蛋白酶（U/g）=(△A 測定管－△A 空白管) ×V 反總÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(△A 測定管－△A 空白管)÷W
    W：樣品質(zhì)量（g）；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），20μL=2×10^-2 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；V 反總：反應(yīng)總體積，220μL=0.22mL； T：反應(yīng)時間（min），4min。
b.使用 96 孔板測定的計算公式如下
（1）按蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個酶活單位。
糜蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測定管－△A 空白管) ×V 反總÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(△A 測定管－△A 空白管)÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計算
活性單位定義：25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個酶活單位。
糜蛋白酶（U/g）=(△A 測定管－△A 空白管) ×V 反總÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(△A 測定管－△A 空白管)÷W
    W：樣品質(zhì)量（g）；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測定；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），20μL=2×10^-2 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；V 反總：反應(yīng)總體積，220μL=0.22mL； T：反應(yīng)時間（min），4min。
注意事項：

1. 臨用前配置的試劑配置好后3天內(nèi)使用完畢。