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土壤淀粉酶（S-AL）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
英文名稱：Soil amylase activity test kit
注意：正式測定之前選擇2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC1920
規(guī)格：50T/24S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：580
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤淀粉酶|土壤淀粉酶活性檢測|土壤淀粉酶檢測|淀粉酶
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體10mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水，置于常溫水中并加熱至煮沸，期間不斷攪拌或震蕩至粉劑溶解。
試劑三：液體65mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1支。10mg 麥芽糖，4℃保存。臨用前加入1.38mL蒸餾水配制成20μmol/mL的儲備液。

產(chǎn)品說明：
淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一類酶的總稱。土壤中的淀粉酶主要來自于微生物，是一種重要的酶制劑，廣泛應(yīng)用于糧食加工、食品、釀造、發(fā)酵、紡織品工業(yè)和醫(yī)藥行業(yè)。
淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖，可與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì)，在540nm處有特征吸收峰，顏色深淺在一定范圍內(nèi)與還原糖量成正比。

需自備的儀器和用品：
天平、水浴鍋、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、甲苯。

操作步驟:
一、樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30~50 目篩。
二、測定步驟：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min，波長調(diào)至540nm。蒸餾水調(diào)零。
2. 將20μmol/mL 的麥芽糖儲備液用蒸餾水稀釋為1、0.9、0.8、0.7、0.6、0.5、0.4、0.3μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
3. 測定步驟：
試劑名稱           測定管          對照管         標(biāo)準(zhǔn)管          空白管
土樣(g)              0.1              0.1              -             -
甲苯（μL）          20               20              -             -
蒸餾水（μL）         -               200             -             -
試劑一（μL）        200              200             -              -
試劑二（μL）        200               -              -               -
充分震蕩混勻，37℃水浴或37℃恒溫箱培養(yǎng)24h，之后12000rpm，常溫離心10min，取上清。
上清液（μL）        300              300              -              -
蒸餾水（μL）         -                -                -             300
標(biāo)準(zhǔn)溶液（μL）       -                -               300             -
試劑三（μL）        700              700              700            700
充分混勻，沸水浴10min，至冰上冷卻，于1mL 玻璃比色皿中測定540nm 處的吸光值，分別記為A 對照管、A 測定管、A 標(biāo)準(zhǔn)管和A 空白管，計(jì)算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。A 空白管只需測1-2 次。

三、土壤淀粉酶活力的計(jì)算:
（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：
以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x 軸，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)為y 軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b。將ΔA 測定帶入方程得到x（μmol/mL）
（2）酶活的計(jì)算：
單位的定義：每天每g 土樣產(chǎn)生1μmol 還原糖定義為一個土壤淀粉酶活力。
S-AL（U/g 土樣）=x×V 反總÷W÷T=0.42×x÷W。

V 反總：酶促反應(yīng)總體積，0.42mL；
W：土樣質(zhì)量，g；
T：反應(yīng)時(shí)間，1d。

注意事項(xiàng)：
1. 當(dāng)ΔA 大于1 時(shí)，建議將上清液稀釋后再進(jìn)行測定，注意在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2. 若ΔA 測定較小，增加反應(yīng)的上清液體積或適當(dāng)增加酶促反應(yīng)時(shí)間，計(jì)算酶活時(shí)對公式進(jìn)行修改。
3. 吸光值請于30min 內(nèi)測定完成。