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土壤中性轉(zhuǎn)化酶（S-NI）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
英文名稱：Soil neutral invertase (S-NI) activity assay kit
注意：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào)：BC4040
規(guī)格：50T/24S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：660
庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤中性轉(zhuǎn)化酶|土壤中性轉(zhuǎn)化酶活性檢測(cè)|S-NI|-S-NI活性檢測(cè)
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入30mL 試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，4℃保存，10mg 無(wú)水葡萄糖。臨用前加入1mL 試劑一溶解,制備10mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液備用。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
S-NI 在中性條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。
S-NI 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)540nm 光吸收增加速率與NI 活性成正比。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水、50 目篩（或更小）、甲苯。

操作步驟：
一、樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過(guò)30~50 目篩。
二、測(cè)定步驟及加樣表：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將10mg/mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液用試劑一稀釋至0.3、0.2、0.1、0.08、0.06、0.04 mg/mL的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
3、加樣表：
試劑名稱        測(cè)定管      對(duì)照管      標(biāo)準(zhǔn)管      空白管
土樣（g）         0.1          0.1         -           -
試劑一（μL）       -           800         -         800
試劑二（μL）      800           -           -         -
標(biāo)準(zhǔn)液（μL）       -            -          800         -
甲苯（μL）         20           20          20         20
混勻，37℃準(zhǔn)確水浴1h 后，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分散失），流水或冰浴冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），10000rpm，常溫離心10min，取上清。
上清液（μL）      700           700         700        700
試劑三（μL）      300           300         300         300
混勻，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分流失），流水冷卻后充分混勻，540nm 處蒸餾水調(diào)零，記錄各管吸光值A(chǔ)，記為A 測(cè)定管、A 對(duì)照管、A 標(biāo)準(zhǔn)管、A 空白管。計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。

S-A I 活性計(jì)算：
1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：
以葡萄糖濃度為x 軸，相應(yīng)的ΔA 標(biāo)準(zhǔn)為y 軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b；將ΔA帶入公式得到x（mg/mL）
2、S-NI 活性計(jì)算
單位定義：37℃每g 土壤每天產(chǎn)生1mg 還原糖定義為一個(gè)酶活性單位。
S-NI（U/g）=x×V 酶促÷W÷T=19.68×x÷W。

V 酶促：酶促反應(yīng)總體積，0.82mL；
W：樣本鮮重，g；
T：反應(yīng)時(shí)間：1/24d。

注意事項(xiàng)：
1、如果加入試劑三，煮沸10min 后有混濁物出現(xiàn)，建議離心除去沉淀（10000rpm，2min），取上清測(cè)定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以用試劑一將上清液稀釋后測(cè)定（計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)）；若吸光值較小，可以增加上清液體積或者土樣鮮重進(jìn)行測(cè)定。