土壤酸性轉化酶（S-AI）活性檢測試劑盒 微量法
- 發(fā)布日期： 2019-05-22
- 更新日期： 2025-07-07
產品詳請
| 產地 |
北京
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| 品牌 |
Solarbio
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| 貨號 |
BC3075
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| 保存條件 |
2-8℃保存
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| 英文名稱 |
Soil acid invertase (S-AI) activity detection kit
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| CAS編號 |
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| 保質期 |
1年
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土壤酸性轉化酶（S-AI）活性檢測試劑盒
微量法
產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil acid invertase (S-AI) activity detection kit
產品商標：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
貨號：BC3075
規(guī)格：100T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；
參考價格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵詞：土壤酸性轉化酶|土壤酸性轉化酶檢測|S-AI|S-AI活性檢測
產品內容：
試劑一：液體40mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前加入10mL 試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑三：液體10mL×1 瓶，4℃保存。
標準品：粉劑×1 支，4℃保存，10mg 無水葡萄糖。臨用前加入1mL 試劑一溶解,制備10mg/mL葡萄糖標準液備用。
產品說明：
S-AI 在pH 為4.5~5.0（酸性）條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是土壤微生物蔗糖代謝關鍵酶之一。
S-AI 催化蔗糖降解產生還原糖，進一步與3,5－二硝基水楊酸反應，生成棕紅色氨基化合物，在540nm 有特征光吸收，在一定范圍內540nm 光吸收增加速率與AI 活性成正比。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿器、冰、蒸餾水、50 目篩（或更?。?、甲苯。
操作步驟：
一、樣品處理：
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30~50 目篩。
二、測定步驟及加樣表：
1、分光光度計/酶標儀預熱30min，波長調至540nm，蒸餾水調零。
2、標準液的稀釋：將10mg/mL 葡萄糖標準液用試劑一稀釋至0.4、0.3、0.2、0.1、0.08、0.06 mg/mL的葡萄糖標準溶液備用。
3、加樣表：
試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管
土樣（g） 0.02 0.02 - -
試劑一（μL） - 160 - 160
試劑二（μL） 160 - - -
標準液（μL） - - 160 -
甲苯（μL） 4 4 4 4
混勻，37℃準確水浴1h 后，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分散失），流水或冰浴冷卻后充分混勻（以保證濃度不變），10000rpm，常溫離心10min，取上清28μL 與112μL 試劑一混合即將上清液稀釋5 倍。
上清稀釋液（μL） 140 140 140 140
試劑三（μL） 60 60 60 60
混勻，煮沸10min 左右（蓋緊，以防止水分流失），流水冷卻后充分混勻，540nm 處蒸餾水調零，記錄各管吸光值A，記為A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管。計算ΔA=A 測定管-A 對照管，ΔA 標準=A 標準管-A 空白管。
三、S-AI 活性計算：
1、標準曲線的繪制：
以葡萄糖濃度為x 軸，相應的ΔA 標準為y 軸，繪制標準曲線，得到標準方程y=kx+b；將ΔA 帶入公式得到x（mg/mL）
2、S-AI 活性計算
單位定義：37℃每g 土壤每天產生1mg 還原糖定義為一個酶活性單位。
S-AI（U/g）=x×V 酶促÷W÷T×5=19.68×x÷W。
V 酶促：酶促反應總體積，0.164mL；
W：樣本鮮重，g；
T：反應時間：1/24d；
5：上清液稀釋倍數
注意事項：
1、如果加入試劑三，煮沸10min 后有混濁物出現(xiàn)，建議離心除去沉淀（10000rpm，2min），取上清測定吸光度；
2、如果吸光值大于1，可以將上清液再進行稀釋；若吸光值較小，可以減少上清液稀釋倍數。兩種操作均要注意改變公式中的稀釋倍數。
