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土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)活性檢測試劑盒說明書
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil α-glucosidase (S-α-GC) activity detection kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC3085
規(guī)格：100 T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤α-葡萄糖苷酶|α-葡萄糖苷酶|S-α - GC|S-α - GC檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：甲苯0.5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入5mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑三：液體15mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，5 mmol/L的對硝基ben酚溶液。臨用前用試劑三將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋50倍得100μmol/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說明：
S-α-GC 能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類代謝方面具有重要生理功能。
S-α-GC 能夠催化對-硝基ben-α-D-吡喃葡萄糖苷生成對-硝基ben酚，后者在400nm 有特征光吸收。

自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、50目篩（或更?。⒓妆剑ú辉试S快遞）和蒸餾水。

操作操作：
一、樣本處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30-50目篩。

二、測定操作：
（1）分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，蒸餾水調(diào)零。
（2）加樣表：
試劑名稱      測定管     對照管     標(biāo)準(zhǔn)管     空白管
風(fēng)干土樣（g）  0.02        0.02        -          -
試劑一（μL）    5           5         -          -
振蕩混勻，使土樣潤濕，室溫放置15min
試劑二（μL）    80          -         -           -
試劑三（μL）   100         100        -           -
混勻， 37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水/冰浴冷卻。
試劑二（μL）     -          80          -           -
10000rpm 25℃離心10min，取上清液
上清液（μL）     100       100          -            -
標(biāo)準(zhǔn)品（μL）      -         -          100            -
蒸餾水（μL）      -         -                        100
試劑四（μL）      200      200         200           200
充分混勻，室溫靜置2min 后，測定吸光值A(chǔ)，分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA=A 測定管-A對照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個測定管設(shè)一個對照管。

三、S-α-GC 活力計算：
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
S-α-GC活力（U/g 土樣）＝ΔA÷ (ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V 反總÷W÷T =0.444× ΔA÷ ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。

T：反應(yīng)時間，1h=1/24d；
V 反總：反應(yīng)體系總體積：1.85×10-4 L；
C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，100μmol/L
W：樣本質(zhì)量。

注意：若ΔA<0.01，可延長37℃水浴時間；若ΔA>1.5，可將上清液稀釋后進行測定；*計算時注意各個因素的改變。