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土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性檢測試劑盒說明書
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil glutaminase (S-GLS) activity assay kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC3975
規(guī)格：100T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1160
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨 
關(guān)鍵詞：土壤谷氨酰胺酶|土壤谷氨酰胺酶活性檢測|S-GLS|S-GLS活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體15mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑二：液體40 mL×1 瓶，4 ℃保存；
試劑三：液體60mL×1 瓶，常溫保存；
試劑四：液體5 mL×1 瓶，常溫保存；
試劑五：液體3 mL×1 瓶，常溫保存；
試劑六：液體3 mL×1 瓶，常溫避光保存；

產(chǎn)品說明：
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些細菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代謝中具有重要調(diào)控作用，尤其是調(diào)節(jié)游離氨含量和尿素代謝。
S-GLS 催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏試劑檢測氨增加的速率，即可計算其酶活性。

試驗需自備儀器和用品：
臺式離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研缽、甲苯、冰和雙蒸水。

測定步驟：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至420nm，蒸餾水調(diào)零。
2、樣品測定（在EP 管中加入下列試劑）：
試劑名稱（uL）         測定管            對照管
樣本                     0.1
甲苯                     25                25
                            振蕩混勻，室溫放置15min
試劑一                  100               100
試劑二                  400               400
                    混勻，37℃水浴2 小時
試劑三                  525               525
     混勻，8000 g，25℃離心10 min；取上清液，依次加入下列試劑
上清液                  130                130
試劑四                   30                30
試劑五                   20                20
試劑六                   20                20
        混勻，室溫靜置15min，420nm 處讀取測定管和對照管吸光值，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。對照管只要做一管

注意：試劑六如出現(xiàn)沉淀，靜置后取上清使用。

四、酶活性計算
計算公式：
a) 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準條件下測定的回歸方程為y=0.0084x-0.005；x 為標(biāo)準品濃度（μmol/mL），y 為吸光值A(chǔ)。
單位定義：每g 土樣每min 催化谷氨酰胺生成1μmol 氨定義為一個酶活力單位。
S-GLS（μmol/min/g 土樣）＝(ΔA+0.005)÷0.0084×V 反總÷W÷T=0.521×(ΔA +0.005)÷W。

V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.525mL；
T：反應(yīng)時間，2h=120min；
W：樣本質(zhì)量，g。

b) 用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準條件下測定的回歸方程為y = 0.0042x -0.005；x為標(biāo)準品濃度（μmol/mL），y為吸光值A(chǔ)。
單位定義：每g 土樣每min 催化谷氨酰胺生成1μmol 氨定義為一個酶活力單位。

S-GLS（μmol/min/g 土樣）＝(ΔA+0.005)÷0.0042×V 反總÷W÷T=1.042×(ΔA +0.005)÷W。
V 反總：反應(yīng)體系總體積：0.525mL；
T：反應(yīng)時間，2h=120min；
W：樣本質(zhì)量，g。