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土壤脂肪酶（S-LPS）活性檢測(cè)試劑盒說明書
可見分光光度法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil lipase (S-LPS) activity test kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
貨號(hào): BC3980
規(guī)格:50T/24S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：520
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤脂肪酶活性檢測(cè)|土壤脂肪酶|S-LPS|S-LPS活性檢測(cè)
產(chǎn)品簡介：
脂肪酶（LPS）又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。該酶在土壤生物動(dòng)力學(xué)中具有重要的作用
LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率，即可計(jì)算LPS 活性。

產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體6mL×1 瓶，室溫保存；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體20mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體60μL×1 支。4℃保存。臨用前加入1.97 mL 甲苯，即100μmol/mL 油酸。用前注意解凍溶解。
工作液的配制：將試劑三臨用前加入20mL 蒸餾水于沸水浴中溶解，冷卻至常溫后加入5mL試劑二混合，高速震蕩2 次，每次3min，間隔5min。4℃保存。也可根據(jù)該比例現(xiàn)用現(xiàn)配。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、甲苯、冰和蒸餾水、30 目篩（或更小）

操作步驟：
一、土樣的處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干，過30-50 目篩。
二、測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至710nm，甲苯調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋：將100 μmol/mL 的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液用甲苯稀釋20 倍即為5μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。
3、操作表：
取一2mLEP 管，加入下列試劑
加入試劑         對(duì)照管        測(cè)定管           標(biāo)準(zhǔn)管             空白管
土樣（g）          0.1           0.1 -
甲苯（μL）         50            50 -
使土樣充分潤濕，常溫放置10min。-
試劑一（μL）       500          500 -
工作液（μL）        -            500 -
37℃水浴反應(yīng)1h，期間可震蕩數(shù)次使土樣和樣品充分接觸。之后沸水浴10min，冷卻至室溫。
-
工作液              500 - -
甲苯（mL）          1.2           1.2 -
反復(fù)震蕩混勻后，室溫4000rpm 離心10 min -
取出離心管，小心吸取上層有機(jī)相1 mL，加入另一1.5mL EP 管中，按下表操作：
上層溶液（mL）       1            1 -
標(biāo)準(zhǔn)品（mL）         -             -               1
甲苯（mL）                                                            1
試劑四（μL）         250           250             250               250
反復(fù)充分震蕩混勻；室溫4000rpm 離心10 min，小心吸取有機(jī)相溶液800 μL，加入1mL 玻璃比色皿，于710nm 處測(cè)定吸光值。記為A 對(duì)照管，A 測(cè)定管，A 標(biāo)準(zhǔn)管，A 空白管，計(jì)算ΔA 測(cè)定= A 測(cè)定管-A 對(duì)照，ΔA 標(biāo)準(zhǔn)= A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。

LPS 活性計(jì)算：
活性單位定義：37℃中每g 土樣每天水解橄欖油生成1μmol 脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mg prot) =ΔA 測(cè)定÷（ΔA 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn)）×V 甲苯÷T÷W= 144×ΔA 測(cè)定÷ΔA 標(biāo)準(zhǔn)÷W。

V 甲苯：加入的甲苯體積，1.2 mL；
C 標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，5 μmol/mL ；
T：催化反應(yīng)時(shí)間，1/24d。
W：樣本鮮重，g；

注意事項(xiàng)：
1、甲苯有毒，實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩。
2、實(shí)驗(yàn)過程中須遠(yuǎn)離火源。
3、當(dāng)吸光度大于0.8 時(shí)，建議將樣本稀釋后測(cè)量（第二次加入甲苯的量增加）。