土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
- 發(fā)布日期: 2019-05-22
- 更新日期: 2025-07-07
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 |
北京
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品牌 |
Solarbio
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貨號(hào) |
BC3985
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保存條件 |
2-8℃保存
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英文名稱 |
Soil lipase (S-LPS) activity test kit
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CAS編號(hào) |
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保質(zhì)期 |
1年
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土壤脂肪酶(S-LPS)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱:Soil lipase (S-LPS) activity test kit
產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
貨號(hào): BC3985
規(guī)格:100T/48S
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;
參考價(jià)格:700
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞:土壤脂肪酶|土壤脂肪酶活性檢測(cè)|S-LPS|活性檢測(cè)|
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
脂肪酶(LPS)又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。該酶在土壤生物動(dòng)力學(xué)中具有重要的作用
LPS 催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS 活性。
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體15mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體5mL×1 瓶,室溫保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;
試劑四:液體10mL×1 瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體60μL×1 支。4℃保存。臨用前加入1.97 mL 甲苯,即100μmol/mL 油酸。用前注意解凍溶解。
工作液的配制:將試劑三臨用前加入16mL 蒸餾水于沸水浴中溶解,冷卻至常溫后加入4mL試劑二混合,高速震蕩2 次,每次3min,間隔5min。4℃保存。也可根據(jù)該比例現(xiàn)用現(xiàn)配。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板(非聚苯乙烯/聚丙烯結(jié)構(gòu))、可調(diào)式移液槍、甲苯、冰和蒸餾水、30 目篩(或更小)
操作步驟:
一、土樣的處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干,過(guò)30-50 目篩。
二、測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至710nm,甲苯調(diào)零。
2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的稀釋:將100 μmol/mL 的油酸標(biāo)準(zhǔn)溶液用甲苯稀釋20 倍即為5μmol/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液待測(cè)。
3、操作表:
取一1.5mLEP 管,加入下列試劑
加入試劑 對(duì)照管 測(cè)定管 標(biāo)準(zhǔn)管 空白管
土樣(g) 0.03 0.03 -
甲苯(μL) 15 15 -
使土樣充分潤(rùn)濕,常溫放置10min。-
試劑一(μL) 150 150 -
工作液(μL) - 150 -
37℃水浴反應(yīng)1h,期間可震蕩數(shù)次使土樣和樣品充分接觸。之后沸水浴10min,冷卻至室溫。
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工作液 150 - -
甲苯(μL) 360 360 -
反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm 離心10 min -
取出離心管,小心吸取上層有機(jī)相0.3mL,加入另一1.5mL EP 管中,按下表操作:
上層溶液(μL) 300 300 -
標(biāo)準(zhǔn)品(μL) - - 300
甲苯(μL) 300
試劑四(μL) 75 75 75 75
反復(fù)充分震蕩混勻;室溫4000rpm 離心10 min,小心吸取有機(jī)相溶液200μL,加入微量玻璃比色皿/96 孔板中,于710nm 處測(cè)定吸光值。記為A 對(duì)照管,A 測(cè)定管,A 標(biāo)準(zhǔn)管,A 空白管,計(jì)算ΔA 測(cè)定= A 測(cè)定管-A 對(duì)照管,ΔA 標(biāo)準(zhǔn)= A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。
LPS 活性計(jì)算:
活性單位定義:37℃中每g 土樣每天水解橄欖油生成1μmol 脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
LPS (U/mg prot) =ΔA 測(cè)定÷(ΔA 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn))×V 甲苯÷T÷W= 43.2×ΔA 測(cè)定÷ΔA 標(biāo)準(zhǔn)÷W。
V 甲苯:加入的甲苯體積,0.36mL;
C 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,5 μmol/mL ;
T:催化反應(yīng)時(shí)間,1/24d;
W:樣本鮮重,g。
注意事項(xiàng):
1、甲苯有毒,實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需佩戴手套和口罩。
2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中須遠(yuǎn)離火源。
3、當(dāng)吸光度大于0.8 時(shí),建議將樣本稀釋后測(cè)量(第二次加入甲苯的量增加)。
4、甲苯可溶解聚苯乙烯/聚丙烯材質(zhì)。