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土壤FDA 水解酶活性檢測試劑盒說明書
微量法

產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
產品商標：solarbio
英文名稱：Soil FDA hydrolase activity test kit
注意：正式測定前務必取2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
貨號：BC0485
規(guī)格：100T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1200
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵詞：土壤FDA水解酶|土壤FDA水解酶活性檢測|土壤FDA水解酶檢測|FDA|FDA水解酶
產品內容：
試劑一：液體50mL×1 瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存，臨用前加2mL 丙tong溶解。
標準品：粉劑×1 瓶，10mg 熒光素，-20℃避光保存。臨用前加入3.03mL 50%丙tong（丙tong（V）：
蒸餾水（V）=1:1）配成10μmol/mL 的熒光素標準溶液，可45℃水浴促進溶解。

產品說明：
FDA 水解反應能很好的反應土壤中微生物活性和土壤質量的變化以及生態(tài)系統(tǒng)中有機質的轉化，是土壤質量研究中的重要生物學指標之一。
FDA 是一種無色化合物，在介質中能被許多土壤酶所催化水解，并經脫水反應，產生酶解終產物熒光素，穩(wěn)定不易被分解，并在490nm 處有強吸收峰，通過檢測490nm 處的吸光值變化可計算得FDA 水解酶活性。

需自備的儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋、丙tong、30 目篩或更小。

操作步驟：
一、樣本處理
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30 目篩。
二、測定操作表
1. 分光光度計/酶標儀預熱30min，調節(jié)波長至490nm，50%丙tong調零。
2. 將10μmol/mL 的熒光素標準溶液用50%丙tong稀釋為2、0μmol/mL 的標準溶液（0 為空白管）。分別吸取200μL 于比色皿/96 孔板中測定490nm 下的吸光度A 標準，A 空白，計算ΔA 標準=A 標準-A 空白。
對照管         測定管
樣本（g）                0.03            0.03
試劑一（μL）             150             150
丙tong（μL）               135              -
試劑二                    15              15
充分混勻，37℃，震蕩1h
丙tong（μL）                 -               135
10000g，25℃，離心5min，取200μL 上清測定490nm 處吸光值A，分別記為A 測定管、A 對照管。計算△A=A 測定管-A 對照管注意：空白管和標準管只需測定一到兩次。

三、FDA 水解酶活性計算公式
酶活性定義：每克土壤每天產生1μmol 熒光素的量為一個酶活力單位。
FDA 活性（U/g 土樣）=（△A÷ΔA 標準×C 標準品）×V 反總÷W ÷T=14.4×（△A÷ΔA 標準）÷W

C 標準品：標準品濃度2μmol/mL；
V 反總：反應總體積，0.3 mL；
W：樣本質量，g ；
T：反應時間，1h =1/24d。

注意事項：
1. 盡量采用新鮮土樣或者短期低溫保存樣品，否則很難準確反映酶的活性。
2. 測定之前進行預實驗，若吸光值大于1.2，請進行適當?shù)南♂屧贉y定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。 若吸光值過小，可增加土樣質量或增加反應時間來進行測定。