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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性檢測試劑盒說明書
可見分光光度法

產地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯東U谷85A三樓
英文名稱：Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
產品商標：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
貨號：BC4000
規(guī)格：50T/24S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：840
庫存狀態(tài)：現貨
關鍵詞：土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶|S-NAG|S-NAG活性檢測
產品內容：
試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入3mL 丙同溶解，用不完的試劑仍-20℃保存；
試劑三：液體60mL×1瓶，4℃保存；
標準品：液體1mL×1支，5 mmol/L的對硝基ben酚溶液，4℃保存。臨用前用試劑一將標準品稀釋50倍得100μmol/L 的標準溶液。

產品說明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。
S-NAG分解對硝基benβ-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基ben酚，后者在400nm有*吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。

自備實驗用品及儀器：
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、30-50目篩（或更?。┖驼麴s水。

操作步驟：
一、樣本處理：
新鮮土樣自然風干或37℃烘箱風干，過30-50目篩。

二、測定步驟：
（1）分光光度計預熱30min，波長調至400nm，蒸餾水調零。
（2）加樣表：
試劑名稱      測定管      對照管      標準管      空白管
風干土樣（g）  0.1          0.1          -           -
試劑一（μL）   550         550          -           -
試劑二（μL）   50           -           -           -
混勻， 37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（蓋緊，防止水分散失），流水/冰浴冷卻。
試劑二（μL）    -           50          -           -
12000g 25℃離心10min，取上清液
上清液（μL）   500          500         -           -
標準品（μL）   -           -          500             -
蒸餾水（μL）   -           -           -             500
試劑三（μL）   1000       1000       1000           1000
室溫靜置2min 后，10000g 常溫離心5min，取上清測定400nm處的吸光值A。分別記為A測定管、A對照管、A標準管、A空白管。計算ΔA=A 測定管-A對照管，ΔA標準=A標準管-A空白管。每個測定管設一個對照管。

三、S-NAG 活力計算：
單位的定義：每天每g土樣中產生1 μmol 對硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
S-NAG活力（U/g 土樣）＝ΔA÷ (ΔA標準÷C標準)×V 反總÷W÷T =1.44× ΔA÷ ΔA標準÷W。

T：反應時間，1h=1/24d；
V 反總：反應體系總體積：6×10-4 L；
C標準：標準溶液濃度，100μmol/L；
W：樣本質量。

注意事項：
1、當ΔA 大于1 時，建議將上清液稀釋后進行測定；當ΔA 小于0.02 時，建議延長反應時間。計算公式中注意乘以稀釋倍數或注意反應時間變化。