土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測(cè)試劑盒 微量法
- 發(fā)布日期: 2019-05-22
- 更新日期: 2025-07-07
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 |
北京
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品牌 |
Solarbio
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貨號(hào) |
BC4005
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保存條件 |
2-8℃保存
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英文名稱(chēng) |
Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
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CAS編號(hào) |
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保質(zhì)期 |
1年
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土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱(chēng):Soil N-acetyl-β-D-glucosidase (S-NAG) activity assay kit
產(chǎn)品商標(biāo):solarbio
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):BC4005
規(guī)格:100T/48S
保存與運(yùn)輸:4℃保存或-20℃保存;
參考價(jià)格:1440
庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞:土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶|S-NAG|S-NAG活性檢測(cè)
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2mL丙tong溶解,用不完的試劑仍-20℃保存;
試劑三:液體30mL×1 瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,5 mmol/L的對(duì)硝基ben酚溶液,4℃保存。臨用前用試劑一將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋50倍得100μmol/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
產(chǎn)品說(shuō)明:
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)是土壤微生物分泌的溶酶體中的一種酸性水解酶。其活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。
S-NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基ben酚,后者在400nm有*吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算NAG活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、30-50目篩(或更?。┖驼麴s水。
操作步驟:
一、樣本處理:
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干,過(guò)30-50目篩。
二、測(cè)定步驟:
(1)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,波長(zhǎng)調(diào)至400nm,蒸餾水調(diào)零。
(2)加樣表:
試劑名稱(chēng) 測(cè)定管 對(duì)照管 標(biāo)準(zhǔn)管 空白管
風(fēng)干土樣(g) 0.03 0.03 - -
試劑一(μL) 165 165 - -
試劑二(μL) 15 - - -
混勻,37℃水浴1h 后,立即沸水浴5min(蓋緊,防止水分散失),流水/冰浴冷卻。
試劑二(μL) - 15 - -
12000g 25℃離心10min,取上清液
上清液(μL) 100 100 - -
標(biāo)準(zhǔn)品(μL) - - 100 -
蒸餾水(μL) - - - 100
試劑三(μL) 200 200 200 200
室溫靜置2min 后,10000g 常溫離心5min,吸取200μL上清于微量玻璃比色皿或直接在96孔板中,測(cè)定400nm處的吸光值A(chǔ)。分別記為A測(cè)定管、A對(duì)照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A對(duì)照管,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
三、S-NAG 活力計(jì)算:
單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1 μmol 對(duì)硝基ben酚定義為一個(gè)酶活力單位。
S-NAG活力(U/g 土樣)=ΔA÷ (ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V 反總÷W÷T =0.432× ΔA÷ ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。
T:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24d;
V 反總:反應(yīng)體系總體積:1.8×10-4 L;
C標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,100μmol/L;
W:樣本質(zhì)量。
注意事項(xiàng):
1、當(dāng)ΔA 大于1 時(shí),建議將上清液稀釋后進(jìn)行測(cè)定;當(dāng)ΔA 小于0.02 時(shí),建議延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。計(jì)算公式中注意乘以稀釋倍數(shù)或注意反應(yīng)時(shí)間變化。