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土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性檢測試劑盒說明書
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil leucine aminopeptidase (L-LAP) activity assay kit
產(chǎn)品商標：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
貨號：BC4025
規(guī)格：100T/48S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1600
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關鍵詞：土壤亮氨酸氨基肽酶|土壤亮氨酸氨基肽酶活

產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃避光保存；臨用前加入3mL丙tong溶解。

產(chǎn)品說明：
S-LAP是一類能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。
S-LAP分解L-亮氨酸對硝基ben胺生成對硝基ben胺，后者在405nm有*吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算S-LAP活性。

自備實驗用品及儀器：
天平、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙tong、30目篩（或更?。?。

操作步驟：

一、樣本處理
土樣自然風干，過30-50目篩。

二、測定步驟
1、分光光度計/酶標儀預熱30min以上，波長調(diào)至405nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表：
測定管      對照管
上樣（g）      0.03         0.03
甲苯（μL）      15          15
震蕩混勻，室溫靜置15min。
試劑一（μL）    255         255
試劑二（μL）     30          -
30℃水浴反應1h后立刻煮沸5min。流水冷卻至室溫。
試劑二（μL）      -          30
14000g 常溫離心10min，取200μL上清于405nm處測定吸光值，分別記為A測定管、A對照管，計算ΔA=A測定管-A對照顧管。

三、酶活計算公式
（1） 按微量比色皿計算：酶活性定義：每克土壤每分鐘生成1nmol 對硝基ben胺為一個酶活力單位。
S-LAP 活性（U/g）=△A/(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.507×△ A÷W 。

ε：對硝基ben胺摩爾消光系數(shù)：9.87×103 L/mol/cm；
d：比色皿光徑，1cm；
V 反總：反應總體積，1mL=3×10-4 L；
W：土樣質(zhì)量，g；
T：反應時間，60min；
109：1mol=109nmol。
（2） 按96孔板計算：
酶活性定義：每克土壤每分鐘氧化1nmol 對硝基ben胺為一個酶活力單位。
S-LAP 活性（U/g）=△A/(ε×d) ×109×V反總÷W÷T=0.844×△ A÷W 。

ε：對硝基ben胺摩爾消光系數(shù)：9.87×103 L/mol/cm；
d：96 孔板光徑，0.6cm；
V 反總：反應總體積，1mL=3×10-4 L；
W：土樣質(zhì)量，g；
T：反應時間，60min；
109：1mol=109nmol。