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土壤β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶（S-C1）活性檢測試劑盒說明書
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Soil β-1,4-glucanase/cellosidase (S-C1) activity assay kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號：BC4035
規(guī)格：100T/48S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：1440
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤葡聚糖酶檢測試劑盒|纖維二糖苷酶檢測試劑盒|S-C1檢測試劑盒|S-C1活性檢測試劑盒

產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：甲苯2mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：粉劑×2瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入7.5mL試劑三，充分溶解備用，用不完的試劑仍4℃保存；
試劑三：液體40mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：液體30mL×1 瓶，4℃保存；
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，5 mmol/L的對硝基ben酚溶液。臨用前用試劑三將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋50倍得100μmol/L 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

產(chǎn)品說明：
β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖苷酶（C1，EC3.2.1.91）存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，C1酶作用于纖維素線狀分子的末端，水解β-葡萄糖苷鍵，每次切下1個纖維二糖分子。
S-C1能夠催化對硝基ben纖維二糖苷(PNPC)生成對-硝基ben酚，后者在400nm有特征光吸收。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、30-50目篩（或更?。?、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。

操作步驟：
一、樣本處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37℃烘箱風(fēng)干，過30-50目篩。
二、測定步驟：
（1）分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，蒸餾水調(diào)零。波長調(diào)至400nm。
（2）加樣表：
試劑名稱      測定管      對照管       標(biāo)準(zhǔn)管      空白管
風(fēng)干土樣（g）   0.03        0.03          -           -
試劑一（μL）     15          15          -           -
振蕩混勻，使土樣潤濕，室溫放置15min - -
試劑二（μL）     120          -           -           -
試劑三（μL）     150         150          -            -
混勻，37℃水浴反應(yīng)1h后，立即沸水浴5min（蓋緊，防止水- -分散失），流水/冰浴冷卻。
試劑二（μL）      -          120          -            -
10000rpm 25℃離心10min，取上清液- -
上清液（μL）     100         100          -            -
標(biāo)準(zhǔn)品（μL）      -           -          100           -
蒸餾水（μL）      -           -                       100
試劑四（μL）     200         200         200          200
充分混勻，室溫靜置2min 后，吸取200μL于微量比色皿/96孔板中測定400nm處的吸光值A(chǔ)，分別記為A測定管、A對照管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A空白管。計算ΔA=A測定管-A對照管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管。每個測定管設(shè)一個對照管。

三、S-C1 活力計算：
單位的定義：每天每g土樣中產(chǎn)生1μmol 對-硝基ben酚定義為一個酶活力單位。
S-C1活力（U/g土樣）＝ΔA÷ (ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷C標(biāo)準(zhǔn))×V 反總÷W÷T =0.684× ΔA÷ ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W。

T：反應(yīng)時間，1h=1/24d；
V 反總：反應(yīng)體系總體積：2.85×10-4 L；
C標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，100μmol/L；
W：樣本質(zhì)量。
注意事項(xiàng)：
1、當(dāng)吸光值大于1.5時，建議將上清液用試劑三稀釋后測定或者減少土樣質(zhì)量測定。