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產(chǎn)品展廳
花青素還原酶(ANR)活性檢測試劑盒 紫外分光光度法
  • 品牌:Solarbio
  • 產(chǎn)地:北京
  • 貨號:BC4090
  • 發(fā)布日期: 2019-05-23
  • 更新日期: 2025-07-07
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 北京
品牌 Solarbio
貨號 BC4090
保存條件 2-8℃保存
英文名稱 Anthocyanin Reductase (ANR) Activity Assay Kit
CAS編號
保質(zhì)期 1年

花青素還原酶(ANR)活性檢測試劑盒說明書
紫外分光光度法

產(chǎn)地:北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱:Anthocyanin Reductase (ANR) Activity Assay Kit
產(chǎn)品商標(biāo):
solarbio

注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號:BC4090
規(guī)格:50T/24S
參考價(jià)格:3000
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞:花青素還原酶|花青素還原酶活性檢測|ANR|ANR活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體30mL×1瓶,4℃保存。臨用前搖晃均勻。
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入3mL蒸餾水備用。
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前加入1mL乙醇和1mL蒸餾水混勻溶解備用。可以分裝后-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
試劑四:液體2mL×1瓶,4℃保存。

產(chǎn)品說明:
花青素還原酶(ANR)是原花青素生物合成途徑中的關(guān)鍵酶,使花色素轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳?yīng)的順式黃烷-3-醇,在植物體內(nèi)起著非常重要的調(diào)控作用。
ANR在NADPH作用下將氯化矢車菊素轉(zhuǎn)化為黃烷-3-醇和NADP,在340nm下測定NADPH的減少速率,即可反映ANR活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
紫外分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽/勻漿器、乙醇、冰和蒸餾水。

操作步驟:
一、樣本處理:
1)組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心15分鐘,取上清,置冰上待測。
2)細(xì)胞或微生物樣品的制備:先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每500萬細(xì)胞或微生物加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)。12000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。

二、測定步驟:
1)紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30min,波長調(diào)至340nm。蒸餾水調(diào)零。
2)加樣表:
試劑名稱(μL)      測定管        對照管
試劑一                850           850
試劑二                 50            50
試劑三                 25            25
樣品                   50             -
上述試劑混勻后37℃水浴反應(yīng)30min。
試劑四                 25            25
樣品                    -            50
混勻后測量測定管和對照管在340nm下的吸光度,分別記為A測定管、A對照管,計(jì)算ΔA=A對照管-A測定管。

三、ANR活力計(jì)算:
1、按蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘減少1nmol NADPH的酶量定義為一個(gè)酶活性單位。
ANR(U/mg prot)=[ΔA÷(ε×d)×109×V反總]÷(V樣×Cpr)÷T =107.18×ΔA÷Cpr。
2、按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘減少1nmol NADPH的酶量定義為一個(gè)酶活性單位。
ANR(U/g 鮮重)=[ΔA÷(ε×d) ×109×V反總]÷(W÷V提取×V樣)÷T =107.18×ΔA÷W。
3、按細(xì)胞或微生物個(gè)數(shù)計(jì)算:
單位的定義:每104個(gè)細(xì)胞或微生物在反應(yīng)體系中每分鐘減少1nmol NADPH的酶量定義為一個(gè)酶活性單位。
ANR(U/104 cell)=[ΔA÷(ε×d) ×109×V反總]÷(500÷V提取×V樣)÷T =0.2144×ΔA。

V反總:反應(yīng)總體積,0.001L;
ε:NADPH的摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;
d:比色皿光徑,1cm;
V樣:加入的樣品體積,0.05mL;
Cpr:樣品蛋白濃度,mg/mL;
W:樣品質(zhì)量,g;
V提取:提取液體積,1mL;
500:500萬個(gè)細(xì)胞;
T:反應(yīng)時(shí)間,30min。

注意事項(xiàng):
1、當(dāng)ΔA大于0.4或者A對照管大于1時(shí),建議將反應(yīng)混合液用試劑一稀釋更大倍數(shù)或者減少加入的樣品體積進(jìn)行測定;ΔA過小時(shí),可以增加酶促反應(yīng)時(shí)間(45min或60min)或增加加入的樣品體積來測定。
2、加入試劑四后,請?jiān)?5min內(nèi)測定完成。
3、樣品蛋白濃度另行測定。

聯(lián)系方式
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