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尿素氮（BUN）檢測試劑盒說明書 微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：Urea nitrogen content test kit
產(chǎn)品商標：solarbio
正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
貨號：BC1535
規(guī)格：100T/96S
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價格：220
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：尿素氮|尿素氮檢測|尿素氮測定|BUN|BUN檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
標準品：液體1mL×1 支，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加4mL 蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體8mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體 8mL×1 瓶，4℃避光保存。

產(chǎn)品說明：
尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物，在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。在堿性條件下，尿酶水解尿素產(chǎn)生氨，氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚，在630nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器：
天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。

操作步驟：
一、樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10 的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），勻漿后于25℃，10000rpm 離心10min，取上清待測。
2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1 的比例（建議500萬個細胞加入1mL 蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3 s，間隔7 s，總時間3min）；然后4℃，10000g 離心10min，取上清置于冰上待測。
3. 血清或其它液體：直接檢測。
二、測定操作
空白管      標準管       測定管
樣品（μL）              -           -            20
標準品（μL）            -           20            -
H2O（μL）             20           -             -
試劑一（μL）           40           40            40
充分混勻，于 37℃反應(yīng) 10min
試劑二（μL）           70           70            70
試劑三（μL）           70           70            70
充分混勻，于 37℃顯色 10min，于微量石英比色皿/96 孔板，雙蒸水調(diào)零，測定630nm 處吸光值，記為 A 空白管、A 標準管和 A 測定管。

三、計算公式：
1. 按樣本質(zhì)量計算：
尿素氮含量（mg/g）= （A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品÷W= 0.005×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）÷W
2. 按細胞數(shù)計算：
尿素氮含量（mg/104cell）= （A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品÷細胞數(shù)量= 0.005×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）÷細胞數(shù)量
3. 按液體體積計算：
尿素氮含量（mg/L）=（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）×C 標準品=5×（A測定管- A空白管）/（A標準管- A空白管）

C 標準品：標準品濃度，5mg/L；
W：樣品質(zhì)量，g

注意事項：
1、配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。
2、*檢測限為80μg/L