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土壤漆酶活性檢測試劑盒說明書
微量法

產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷85A三樓
英文名稱：
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
注意：正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
貨號(hào)：BC1965
規(guī)格：100T/48S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：1440
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：土壤漆酶|土壤漆酶檢測|漆酶|漆酶活性檢測
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體30mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×2 瓶，4℃避光保存，臨用前每瓶加7.5mL試劑一溶解。
試劑三：液體3mL×1瓶，常溫保存。若有白色物質(zhì)析出，放于37℃中溶解即可。

產(chǎn)品說明：
土壤漆酶（SL）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍(lán)氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，具有較強(qiáng)的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。
漆酶分解底物ABTS 產(chǎn)生ABTS 自由基，在420nm 處的吸光系數(shù)遠(yuǎn)大于底物ABTS，測定ABTS自由基的增加速率，可計(jì)算得漆酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、震蕩儀、30目篩（或更?。?。

操作步驟：
一、樣本處理
新鮮土樣風(fēng)干，過30目篩。
二、測定操作

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到420nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 加樣表：
試劑名稱      測定管       對(duì)照管
土樣（g）      0.03          0.03
試劑一（μL）    135           135
試劑二（μL）    150            -
37℃水浴反應(yīng)10min。
試劑三（μL）     15            15
試劑二（μL）     -             150
4℃ 12000g 離心15min，取200μL上清于420nm測定其吸光值，分別記為A測定管、A對(duì)照管，計(jì)算ΔA=A測定管-A對(duì)照管。

三、 土壤漆酶（SL）活性計(jì)算公式

（1） 按微量比色皿計(jì)算：
酶活性定義：每克土壤每分鐘生成1nmol ABTS自由基所需的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）。
SL活性（U/g）= ΔA/(ε×d)×109×V 反總÷W÷T= 0.833×△ A÷W。

ε：ABTS自由基摩爾消光系數(shù)：36000L/mol/cm；
d：比色皿光徑，1cm；
V 反總：反應(yīng)總體積，3×10-4L；
W，樣本質(zhì)量，g；
T：反應(yīng)時(shí)間，10min。

（2） 按96孔板計(jì)算：
SL活性（U/g）= ΔA/(ε×d)×109×V 反總÷W÷T= 1.39×△ A÷W。

ε：ABTS 摩爾消光系數(shù)：36000L/mol/cm；
d：比色皿光徑，0.6cm；
V 反總：反應(yīng)總體積， 3×10-4L；
W，樣本質(zhì)量，g；
T：反應(yīng)時(shí)間，10min。

注意事項(xiàng)：
1. 工作液需臨用前配制，并且盡快使用，4℃保存一周，若變色則不能使用。
2. 測定之前進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，若吸光值較高（A＞1.5），請(qǐng)將減少土樣質(zhì)量再進(jìn)行測定。若數(shù)值偏小可以延長反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行測定。
3. 離心后若上清仍然渾濁，可再次離心去除。