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產(chǎn)地 | 北京 |
品牌 | solarbio |
貨號 | DS0150 |
保存條件 | 現(xiàn)詢客服 |
英文名稱 | Affinity Columns(without media),50ml(2.5*16) |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 現(xiàn)詢客服 |
親和層析柱空柱
親和層析是利用生物分子間所具有的專一親和力而設計的層析技術。
如抗原和抗體,蛋白質(zhì)A與-些抗體,重組蛋白質(zhì)和一些金屬離子之間,均具有專一的親和力,在一定條件下能緊密結合成復合物,而這種結合又是可逆的,改變條件可相互解離。
當把可結合的一對分子的一方(稱配體)結合在惰性載體上使其固相化,另一方隨流動相流經(jīng)該載體,雙方即結合為一整體。然后設法將它們解離,從而得到與配體有特異結合能力的某一特定的物質(zhì)。
索萊寶生物提供的親和層析柱空柱是專門為實驗室小批量純化抗體、重組蛋白或其它分子而設計,方便進一步進行科學研究。
親和層析柱空柱所用的柱子為聚丙烯塑料,這種工程材料通過大量的應用證明具有清潔無毒,不與生物分子結合和低溶解度的優(yōu)點。
親和層析柱空柱所用的篩板是選用純凈的UHWMPE為原料,經(jīng)獨特的工藝加工而成,具有親水性。篩板在裝填時安置在填料基質(zhì)的上下端,以阻擋昂貴的基質(zhì)滲出。
親水性篩板采用了*的親水性UHWMPE生產(chǎn)技術,該篩板能保證使用重力法時的流速為1-2mL/分鐘或1-2滴/秒。同時,該篩板和其它供應商相比,不會由于親水性基團的引入而對蛋白質(zhì)產(chǎn)生吸附。另外,該親水性篩板在使用過程中不易形成氣泡,氣泡會使流速降低,液體通過基質(zhì)不均勻。
親和層析柱空柱可配套針筒注射器、裝柱推桿和聯(lián)接管,方便柱子的裝填并和蠕動泵等設備配套使用。
親和層析柱空柱用于抗體純化
金黃色葡萄球菌蛋白A(Protein A,SPA)能與人及多種哺乳動物血清IgG分子中的Fc片段結合,結合的親和性次序依次是豬、狗、兔、人、猴、鼠、小鼠及牛。
SPA除與IgG結合外,還能與血清中少量的IgM和IgA結合,SPA菌對各類免疫球蛋白的吸附率:IgG為90%~98%,IgM為2%~30%,IgA為1.5%~20%。
純化抗體一般用Protein A作為純化的配體,也可以用Protein G,Protein L或異源性抗體作為配體。
親和層析柱空柱用于小分子物質(zhì)提取
(以提取黃曲霉毒素M1為例)
試樣通過免疫親和柱時,黃曲霉毒素M1被提取。親和柱內(nèi)含有的黃曲霉毒素M1特異性單克隆抗體交聯(lián)在固體支持物上,當樣品通過親和柱時,抗體選擇性的與黃曲霉毒素M1(抗原)鍵合,形成抗體一抗原復合體。用水洗柱除去柱內(nèi)雜質(zhì),然后用洗脫劑洗脫吸附在柱上的黃曲霉毒素M1,收集洗脫液。用帶有熒光檢測器的高效液相色譜儀測定洗脫液中黃曲霉毒素M1含量。
親和層析柱空柱用于重組蛋白純化
近年來,隨著生物技術,別是基因工程技術的迅猛發(fā)展,重組蛋白表達和純化越來越容易。常用的重組蛋白表達策略是把蛋白與親和標簽融合表達,利用親和標簽一步純化出目標蛋白。此方法無需了解蛋白質(zhì)的生化特性或生理活性,就可通過帶標簽的重組融合蛋白選擇性地與層析基質(zhì)上的配體結合,從而得以純化任何蛋白質(zhì)。此方法與常規(guī)的層析方法不同之處在于,無需針對不同的蛋白質(zhì)開發(fā)特定的配體和方法。采用保護蛋白質(zhì)結構和功能完整性的溫和條件,可一步親和層析從粗提物中純化出重組蛋白,純度可達90%以上。
親和標簽已成為后基因組學時代純化重組蛋白常用手段。親和標簽系統(tǒng)一般具有以下特征:(a)一步的吸附純化;(b)對三級結構和生物活性影響?。?c)可方便且專一的去除以產(chǎn)生天然蛋白質(zhì);(d)在純化過程中重組蛋白的分析簡便準確;(e)適用于大量的不同蛋白質(zhì)。但是沒有哪個標簽是*的,只能根據(jù)實際需要去自己篩選,下表是部分的標簽以及純化的方案。