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| 產(chǎn)地 | 北京 |
| 品牌 | solarbio |
| 貨號 | T2210 |
| 用途 | 科研用 qPCR |
| 英文名稱 | TaqMan One Step RT-qPCR Kit |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 100% |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詢客服 |
| 是否進口 | 否 |
貨號：T2210
規(guī)格：50T/200T（25μl 體系為例）
試劑組成：
25×One Step RT-qPCR RTase mix
5×One Step RT-qPCR Buffer
10×Enhancer
保存：
-20℃保存長期保存，使用前應混勻，避免反復凍融。
產(chǎn)品說明：
TaqMan One Step RT-qPCR kit （qRT-PCR Probe）是一步法（One Step）RT-PCR 熒光定量探針 法定性、定量反應的專用試劑，反應過程在同一管內(nèi)連續(xù)進行，避免開管，能有效防止污染。本品 含有高溫反轉(zhuǎn)錄酶（RNase H-）和新型熱啟動酶，具有更高的反轉(zhuǎn)錄和 PCR 擴增效率，適合于低 濃 度 RNA 模板的高靈敏度擴增。本試劑采用優(yōu)化配方的專用 Buffer，可以在較寬的定量區(qū)域內(nèi) 得到良 好的標準曲線，準確進行定量，并與多數(shù)廠家的熒光定量 PCR 儀兼容，如 Applied Biosystems、 Eppendorf、Bio-Rad 和 Roche 等。
試劑原理：
TaqMan One Step RT-qPCR kit首先利用反轉(zhuǎn)錄酶RTase將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以cDNA為模板 通過熱啟動DNA擴增酶在單管閉管反應體系中連續(xù)進行PCR擴增反應，利用熒光標記探針（Probe） 水解發(fā)光，并對發(fā)光信號進行檢測。
1. RT-PCR 首先采用反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成 cDNA，然后再以合成的cDNA為模板，經(jīng)過PCR擴增反應的 熱變性、引物退火、鏈延伸三個步驟循環(huán)往復，在短時間內(nèi)擴增得到大量DNA片段。
2. 熒光檢出 TaqMan 探針法是使用 5’端帶有熒光物質(zhì)，3’端帶有淬滅物質(zhì)的 TaqMan 探針進行熒光檢測的方法。 在探針沒有被 Taq 酶分解時，5’端的熒光物質(zhì)受到 3’端淬滅物質(zhì)的制約，不能發(fā)出熒光。而當 TaqMan 探針被分解后，5’端的熒光物質(zhì)便會游離出來，發(fā)出熒光。在 PCR 反應液中加入熒光探針后的退火 過程中，熒光探針便會和模板配對區(qū)域結(jié)合。在 PCR 反應的延伸過程中，Taq DNA 聚合酶的 5’→3’ 核酸外切酶活性可以分解和模板雜交的熒光探針，游離出的熒光物質(zhì)便會發(fā)出熒光。通過檢測反應 體系中的熒光強度，可以達到檢測 PCR 產(chǎn)物擴增量的目的。
